一种基于分子的流感病毒A型和B型定量检测方法

0 次观看3:49 分钟 • July 8th, 2025

取一个分子检测系统,该系统包含预装的样本接收器、转移 cartridge 和检测底座。 

检测底物含有带切口位点的T1和T2引物以及流感病毒的反应管  A 和 B 识别区域、酶混合物以及带有荧光基团和淬灭基团的分子信标。

将含有病毒的鼻咽样本从样本接收器中的裂解缓冲液转移至检测底座。

病毒裂解释放RNA,随后T2引物结合至RNA的靶区域,并由逆转录酶进行延伸。

另一条T2引物结合到相同的RNA上——置换最初延伸的链。

T1引物结合到被置换的链上,DNA聚合酶对其进行延伸。一种切刻酶在其识别位点进行切割,通过聚合反应和链置换作用,形成双链DNA。

该过程持续进行,扩增具有单链突出端的双链片段。

分子信标与突出端结合,使荧光基团与淬灭基团分离,产生荧光,从而定量检测甲型和乙型流感病毒。

开始测试流程时,触摸仪器屏幕上的运行 测试。接下来,使用屏幕上的键盘或条形码扫描器输入患者编号,然后按确定。随后,打开盖子,将橙色检测底管插入橙色检测底管架中。确认屏幕上显示的检测项目正确无误后,按下确定。然后,将蓝色样本接收器插入蓝色样本接收器架中,并等待样本接收器升温。之后,用两根手指按住样本接收器边缘,以确保其保持原位,再撕去箔密封膜。

然后,将待检测的患者拭子放入样本接收管中。用力在液体中搅动拭子10秒,并将拭子头部按压在样本接收管的管壁上,以帮助标本从拭子上脱落。如果检测拭子保存在病毒运输液中,则将病毒运输液涡旋震荡10秒,取200微升加入样本接收管中。然后,按确定继续操作。

随后,将白色转移 cartridge 插入蓝色样本接收器中。持续按压样本接收器,直至橙色指示条上升。然后提起并连接转移 cartridge 至检测底座。当 cartridge 转移正确连接后,橙色指示条应下降。盖上盖子,在结果界面出现之前不要打开。

现在,触摸 运行 质量控制 在主屏幕上进行测试。选择要运行的质控测试,然后通过点击确认测试类型,以确保其与拟测试的质控样本相匹配。 好的 并按照屏幕提示完成检测。测试运行结束后,观察屏幕上显示的结果,根据提示判断是否存在甲型流感、乙型流感或未知亚型;若结果无效,则需重新进行检测。