0 次观看 • 4:42 分钟 • January 15th, 2026
取一滴新鲜的小鼠尿液，浸入含有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶和显色原的葡萄糖检测试纸中。
葡萄糖氧化酶可氧化尿液中的葡萄糖，生成葡萄糖酸内酯和过氧化氢。
此外，过氧化物酶利用过氧化氢催化生色原的氧化反应，生成有色产物，其颜色强度与尿液葡萄糖浓度成正比。
将颜色与试纸条上的参考色卡进行比较，以定性评估尿液中的葡萄糖。
进行定量尿液葡萄糖检测时，取一块含葡萄糖浓度标准品的多孔板以及在特定时间段内收集的小鼠尿液样本。
加入含有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶和指示剂偶联试剂的检测混合液。
葡萄糖氧化酶促进葡萄糖的氧化，生成葡萄糖酸内酯和过氧化氢。过氧化物酶催化偶联试剂与过氧化氢之间的反应，形成粉红色产物。
使用酶标仪测定有色产物的吸光度。
根据生成的葡萄糖标准曲线，测定尿液中的葡萄糖浓度。
首先将一块干净的石蜡膜平放在平坦的表面上。轻轻抓住小鼠的尾巴，将其放在石蜡膜上。
用拇指和食指抓住小鼠颈背部皮肤以固定小鼠，使其因应激反应而排尿。让一滴尿液滴落在Parafilm表面，然后将小鼠放回笼中。
将葡萄糖检测试纸的试剂端浸入新鲜尿液滴中。立即取出试纸，平放在表面上，确保显色面朝上。然后等待至少30秒，直至试纸上颜色完全显色。将显色结果与制造商提供的比色卡进行比对。
根据制造商的说明组装代谢笼，并将粉末状饲料装入饲料组件中，然后将其连接到上室相应的金属卡扣上。
将水瓶支架固定在上腔剩余的金属片上。将空水瓶装满水后插入瓶架中，并确保吸水管插入孔内。
将一只小鼠放入代谢笼中，并盖上笼盖，确保笼盖安装到位。将尿液收集管和粪便收集管分别放置在下层 chamber 底部的相应位置。
24小时后，取出尿液收集管，进行葡萄糖检测以确定尿液中的葡萄糖浓度。如果当天无法进行葡萄糖检测，应将尿液样本置于-80°C冰箱中冷冻保存。
若使用冷冻的尿液样本，需先将其解冻。根据检测试剂盒说明书，配制浓度范围为25至0毫克/分升的八个标准品。
根据试剂盒说明书，在96孔板中设置标准品孔和尿液样本孔，均设复孔。向所有孔中加入推荐量的酶混合液以启动反应。盖好板子，在37摄氏度下孵育10分钟。然后使用酶标仪在500至520纳米波长处读取吸光度。
根据检测试剂盒说明书分析数据，绘制各标准品的吸光度与葡萄糖浓度的关系曲线。利用该曲线确定24小时尿液样本中的葡萄糖浓度。如果尿液浓度超出标准范围，则对尿液样本进行稀释。