一种构建人PBMC嵌合人源化异种移植小鼠模型的技术

取一只仅以中性粒细胞和单核细胞作为功能性免疫细胞的免疫缺陷小鼠。

腹腔注射环磷酰胺，一种靶向免疫前体细胞的药物。

该药物进入活跃增殖的免疫前体细胞，并与核酸发生交联，导致细胞死亡。前体细胞的死亡可引起免疫细胞耗竭。

口服给予双硫仑，该药物可与环磷酰胺形成加合物，从而减轻环磷酰胺引起的副作用。

皮下注射人肿瘤细胞与外周血单个核细胞（PBMCs）的混合物，置于适当的胶状蛋白质基质中。

蛋白质混合物形成凝胶，模拟生理状态下的细胞外基质，并包埋肿瘤细胞。

功能性免疫细胞耗竭使得肿瘤细胞得以增殖并形成新的血管，进而转化为实体瘤异种移植模型。

同时，注射的PBMC中的T细胞浸润到肿瘤中。

肿瘤异种移植模型表现出生长及肿瘤浸润性T细胞，从而建立了人源化异种移植小鼠模型。

对于髓系细胞清除，以100毫克/千克剂量经腹腔注射环磷酰胺，并以125毫克/千克剂量经口服给予双硫仑，对6至8周龄的NOD/SCID雌性小鼠每天给药一次，连续给药两天。第二次给予环磷酰胺和双硫仑后24小时，将5 × 10⁶个新鲜分离的人外周血单个核细胞（PBMC）和2.5 × 10⁶个人肿瘤细胞系细胞重悬于每只动物200微升含50% Matrigel的磷酸盐缓冲液（PBS）中，随后将全部体积皮下注射至每只实验动物的右侧 flank 区域。每周测量并记录原位肿瘤体积两次，持续4至6周。