评估一种细菌免疫调节蛋白在小鼠模型中的抗肿瘤疗效

取一只仰卧位的雌性小鼠，该小鼠已麻醉，并在其膀胱上皮中带有尿路上皮肿瘤。

固定后肢，找到尿道开口，并将导管插入小鼠膀胱。冲洗膀胱以清除尿液。

注射幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白（Helicobacter pylori neutrophil-activating protein），即 HP-NAP——一种免疫调节性细菌蛋白。

在肿瘤微环境中，HP-NAP 与中性粒细胞上的 Toll 样受体相互作用，并启动信号级联反应，从而增强促炎性细胞因子的表达。

细胞因子可诱导初始T淋巴细胞分化为产生干扰素-γ的1型辅助性T细胞（Th1）和1型细胞毒性T细胞（Tc1）。

干扰素-γ 抑制新血管的形成，限制肿瘤的营养和氧气供应。

此外，它可上调肿瘤细胞上呈递肿瘤抗原的MHC分子，促进其与Tc1细胞的相互作用。

这种相互作用导致细胞毒性分子的释放，从而诱导肿瘤细胞死亡，表明HP-NAP具有抗肿瘤功效。

注射 MB-49 细胞后至少三天，麻醉动物，按前述方法进行导尿操作，使用 1 毫升注射器加入 200 至 300 微升无菌 PBS，冲洗膀胱中残留的尿液，并将所有液体吸出。

将每150 µL PBS 中含50 µg的幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白（Helicobacter pylori neutrophil-activating protein，HPNAP）注入膀胱，注射后保持注射器与导管连接以避免泄漏。一小时后，轻柔地从尿道取出导管，并将小鼠置于装有加热灯的笼中，直至其苏醒。