一种带血管异位脾脏移植的小鼠模型

取一只已麻醉的受体小鼠进行脾脏移植。

做正中切口，暴露腹腔，并移开肠管以找到脾脏。

结扎脾动脉和脾静脉以减少出血，并切除脾脏。

将肠管外置，并用浸有生理盐水的纱布覆盖，以保持暴露组织的湿润。找到下腔静脉（IVC）以及邻近的肾下腹主动脉（IAA）。

结扎下腔静脉（IVC）和肠系膜上动脉（IAA）的分支。夹闭血管以阻断血流，并为连接供体脾脏创造开口。

用肝素化生理盐水冲洗血管，以清除血液并防止血凝块形成。

将供体脾脏异位放置，将其动脉与腹主动脉（IAA）开口连接，静脉与下腔静脉（IVC）开口连接。

移除夹子以恢复脾脏的血流，并关闭切口。

皮下注射温热的生理盐水以使小鼠重新水化，并监测其恢复情况。鉴定小鼠体内存活供体脾脏免疫细胞，以确认移植成功。

进入受体腹腔 通过 手术区域准备完毕后，沿中线切开，如同供体手术操作，通过结扎脾静脉和脾动脉切除受体原有的脾脏。用37摄氏度浸湿的纱布覆盖肠组织，并小心将肠管移至左侧。

在下腔静脉（IVC）内分离并结扎肾下主动脉的腰动脉分支，并使用两个4毫升的微血管夹在下腔静脉内对肾下主动脉进行交叉阻断。将一根11-0尼龙缝线穿过肾下主动脉，牵引血管以利于使用显微剪刀制作椭圆形主动脉切口。

使用30号针头穿刺下腔静脉（IVC），形成椭圆形静脉切口，并将切口延长至供体门静脉的长度。用500微升肝素化生理盐水冲洗主动脉和下腔静脉，以清除血管内的管腔血液或血凝块，随后将供体脾脏移植物植入受体腹部右侧 flank 区域。

仔细辨认供体主动脉袖和门静脉。确认血管无扭曲后，用4摄氏度的生理盐水浸湿的纱布覆盖脾脏移植物。使用两根11-0尼龙固定缝线，将供体主动脉袖分别连接至受体主动脉切口的近端和远端顶点，并在供体主动脉袖与受体主动脉切口前壁之间，用2到3针连续的11-0尼龙缝线完成吻合。将脾脏移植物转向受体左侧，完成供体主动脉袖与受体主动脉切口后壁的吻合。

使用连续缝合线，在供体门静脉与受体下腔静脉的每一侧各缝4至5针，完成静脉吻合。首先在血管腔内缝合后壁，然后使用同一根缝线闭合前壁。最后在下腔静脉外侧的下角处打结，完成吻合。

现在，松开血管夹，使用无菌棉签压迫止血，直至脾脏颜色恢复。用5-0合成可吸收缝线以连续缝合方式关闭腹腔。用5-0尼龙缝线以间断缝合方式缝合皮肤层。

然后，在四个不同的部位分别皮下注射 250 微升温热的生理盐水，并在术后最初几小时内将小鼠置于 30 摄氏度温控培养箱中保温，持续监测直至动物恢复足够意识，可转移至饲养笼。