小鼠模型中通过鼻内免疫接种卡介苗

0 次观看2:16 分钟 • July 8th, 2025

取一只已麻醉的小鼠,通过其鼻腔接种一株减毒活疫苗卡介苗(BCG),该菌株为Mycobacterium bovis,致病能力已减弱。

注射的细菌会刺激肺组织及邻近淋巴结产生免疫反应。

这会产生成效T细胞和B细胞,这些细胞进入小鼠的循环系统。

效应B细胞产生针对分枝杆菌的抗体。

与此同时,效应T细胞会定居在肺组织中,形成常驻记忆T细胞或TRM细胞,从而提供长期免疫保护。

为了评估免疫效果,通过小鼠鼻腔给予具有致病能力的活体强毒分枝杆菌。

这会触发肺组织中 TRM 细胞的活化。

活化的 TRM 细胞释放细胞因子,吸引其他免疫细胞,包括效应 B 细胞。

这些B细胞分泌可与分枝杆菌结合的抗体,促进中性粒细胞对其清除,表明免疫接种成功。

进行鼻内给药时,用微量移液器吸取20 µL的BCG悬液,将麻醉后的小鼠置于生物安全柜内呈仰卧位。将接种物以滴状给于两鼻孔之间,直至全部20 µL体积均已被吸入,每滴之间留出时间使小鼠充分吸入悬液。随后,重新用另一份20 µL细菌悬液装填移液器,并重复给药过程。

对于使用 H37Rv 结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)菌株进行鼻内攻击,在疫苗接种后的适当实验时间点,通过鼻内给予 40 微升 H37Rv 菌液悬液,对动物进行接种,操作方法如前所述。