0 次观看 • 3:33 分钟 • July 8th, 2025
从一只缺乏白细胞介素-10（一种抗炎性细胞因子）的小鼠开始，该小鼠会出现结肠炎症。
取一支装有富含多种肠道微生物的粪便悬液的注射器，该悬液来自一只健康小鼠。
接下来，将一根口腔管连接到注射器上。
将此管插入小鼠口腔，并引导其向下进入胃部。
现在，将粪便悬液直接注入胃内，使其逐渐到达结肠。
一旦进入结肠，粪便微生物便会增殖并定植，从而重建肠道微生物群。
定植的微生物随后会释放多种次级代谢产物。
这些代谢物有助于黏蛋白的产生，从而修复结肠上皮并恢复肠道完整性。
在结肠上皮内，粪便微生物及其代谢产物与免疫细胞相互作用。
这种相互作用会促使免疫细胞释放抗炎性细胞因子，从而减轻白细胞介素-10缺陷型小鼠的结肠炎症。
通过将10%甘油溶液加入生理盐水中，制备无菌溶液。每克粪便颗粒加入10毫升该溶液至锥形管中。使用台式匀浆器在生物安全柜内以低速匀浆三次，每次30秒，以重悬粪便。将粪便悬液通过两层无菌棉纱布过滤。滤液可暂时储存于冰箱中，最长六小时；或分装至无菌冻存管中，于-80摄氏度冰箱中保存。
按照标准操作程序彻底清洁匀浆器或搅拌器。若使用冷冻样品，需将冷冻的粪便悬液置于冰上解冻。通过涡旋振荡充分混匀解冻后的粪便悬液。将新鲜或解冻的粪便悬液转移至1毫升注射器中。称量小鼠体重，并选择合适的灌胃针头尺寸及最大给药体积。
通过测量小鼠鼻尖至胸骨底部的长度来测试灌胃针的长度。用生理盐水中的10%甘油或粪便悬液填充注射器，并去除注射器和针头内的气泡。将一个鼠笼放入生物安全柜中，取下塑料笼盖，保留金属架。
用一只手打开金属架。抓住一只小鼠的尾巴，将其放在金属架上。用一只手握住小鼠尾巴，另一只手的拇指和中指捏住肩部上方的皮肤以固定动物。轻轻向后伸展动物头部，并用一只手将头部固定到位。将灌胃针置于口腔内舌面上方。
沿着上颚轻轻推进，直至针头到达食管。以流畅的单个动作插入针头。确认针头正确就位后，通过推动连接针头的注射器缓慢注入物质。给药完成后，轻柔地拔出针头。标记小鼠并将其放回原笼。观察动物5至10分钟，注意是否存在呼吸困难或不适的迹象。在粪便微生物群移植后12至24小时再次观察小鼠。