一种用于分子延迟爆发释放的新型递送平台的制备技术

0 次观看3:50 分钟 • July 8th, 2025

将带有分配管的注射器连接至泵。该注射器内含光引发剂-聚酯混合物,一种独特的聚合物混合物。

将混合物注入纤维素基聚合物的黏性水溶液中。这会诱导相分离,形成一种称为聚合物微泡的球形聚合结构。

紫外线照射激活光引发剂,引发聚合物交联,形成包裹内核的壳层。

接下来,插入一根针头,将荧光标记分子的黏性溶液注入聚泡核心。

再次辐照以恢复多泡体完整性。冷冻干燥以去除过量水分并回收多泡体。

为了检测释放曲线,将聚泡在缓冲液中孵育。

当聚合物外壳与水相接触时,会发生侵蚀,从而形成孔隙。随着时间推移,这些孔隙相互连通, 释放出标记的分子。

定期收集上清液,并定量检测荧光强度。

长时间孵育后荧光突然增强,证实了延迟的爆发式释放。

制备聚泡时,首先使用1毫升移液管将800微升10%的羧甲基纤维素(CMC)加入0.92毫升玻璃小瓶中。合成PCLTA时,将每毫升1,000克的14千道尔顿PCL溶于200微升二氯甲烷(DCM)中。合成PLGADA时,将每毫升1,000克的5千道尔顿PLGADA溶于200微升氯仿中。

将光引发剂与目标聚合物混合物按0.005比1的比例混合,取200 µL所得溶液加入安装在注射泵上的1 mL玻璃注射器中,该注射器连接内径为0.016英寸的不锈钢 dispensing 管。

使用微型电机控制聚合物管的前后运动,将聚合物注入玻璃小瓶中的10% CMC中以形成聚泡,并在波长254纳米、功率2瓦/平方厘米的紫外光下照射60秒使其固化。随后,将聚泡在液氮中速冻30秒,并在0.01毫巴真空度和-85摄氏度条件下冻干过夜。

为了将目标货物置于多泡体中心,将货物与5%羧甲基纤维素(CMC)混合,并在旋转仪上过夜孵育,以增加货物的黏度,然后手动将2微升货物混合物注入多泡体中。当所有货物均被注入后,按照前述方法对注入货物的多泡体进行重新固化、闪冻并冻干处理。

第二天早上,使用镊子将聚泡从干燥的羧甲基纤维素(CMC)上分离,并用去离子水清洗聚泡,以去除任何残留的 CMC。然后将聚泡切成两半,并通过共聚焦显微镜对两半进行成像,以确保载荷位于中心。

对于小分子货物的释放,将聚合泡与中心化的吖啶黄和400微升PBS在37摄氏度下孵育适当的时间。在每个实验时间点,收集上清液,并向小瓶中加入400微升新鲜PBS。然后,使用酶标仪定量所收集上清液的荧光强度。