一种针对斑马鱼胚胎中Pseudomonas aeruginosa感染的噬菌体疗法

取对Pseudomonas aeruginosa感染易感的麻醉去壳囊性纤维化斑马鱼胚胎。

将表达荧光蛋白的Pseudomonas aeruginosa注入主要血管——库维尔管。

将注射后的胚胎转移至含有培养基和色素阻断剂的培养板中，以抑制胚胎色素形成并可视化细菌。孵育。

注射的细菌通过循环系统移动并侵入器官。 

作为响应，宿主免疫系统被激活，释放促炎介质并募集免疫细胞。

孵育后，注入针对烈性噬菌体的混合液 铜绿假单胞菌 注入Cuvier管并将胚胎转移至含有培养基和色素阻断剂的培养皿中.

孵育。噬菌体感染细菌，并利用宿主的细胞机制产生新的噬菌体颗粒。

细菌裂解，释放出感染邻近细菌的噬菌体，从而导致促炎反应减弱。

使用荧光显微镜观察斑马鱼胚胎中随时间推移细菌荧光的减弱，表明噬菌体对Pseudomonas aeruginosa具有抑制效果。

受精后26小时，用约5微升的P. aeruginosa接种液填充显微注射针，将针头从胚胎背侧插入至Cuvier管起始处，即Cuvier管开始沿卵黄囊扩散的位置。向胚胎内注射1至3纳升PAO1接种液，确保液体体积直接在管腔内扩张，并进入循环系统。

注射后，将胚胎转移至两个新的培养皿中的一个，培养皿中含有添加了苯硫脲的新鲜E3培养基，在28摄氏度下孵育30分钟或3小时。接着，用约5微升的噬菌体混合液填充显微注射针，并将针固定到显微注射仪上。然后，向先前已注射细菌的每个胚胎的居维叶管内注射1至3纳升的噬菌体混合液，并将胚胎放入两个新的培养皿中的一个，培养皿中含有添加了苯硫脲的新鲜E3培养基，置于28摄氏度环境中。