0 次观看 • 4:31 分钟 • July 8th, 2025
将一只麻醉后且后肢脱毛的大鼠置于解剖显微镜下的保温垫上。
切开皮肤并分离筋膜，暴露跟腱复合体。
去除趾长屈肌腱，并从跟腱上切除一小段组织，形成损伤。
缝合切口并让大鼠恢复。
从遗传背景不同的供体大鼠采集全血，并与抗凝剂混合。
离心以获得下层的红细胞和上层的富血小板血浆（PRP）。
将PRP转移至离心管中，离心沉淀血小板。部分去除上清液，重悬血小板以获得浓缩的PRP。
加入氯化钙并孵育以诱导血小板活化。随后，将活化的血小板注入受体的缝合部位。
活化的血小板释放特定的细胞因子和生长因子，诱导损伤部位的肌腱修复。
首先对大鼠进行称重并佩戴耳标。通过脚趾夹捏确认麻醉程度适当后，向动物角膜滴加水滴，并去除左后肢的毛发。使用1:10稀释的碘伏溶液对暴露的皮肤进行消毒，并将动物置于20摄氏度的加热垫上，在解剖显微镜下进行操作。
在侧卧位姿势下，将左后肢置于上方位置，用镊子夹住左后肢足掌，使用精细剪刀在跟腱周围做一长度为20至25毫米的侧方皮肤切口。分离筋膜以暴露跟腱复合体，并切除趾长屈肌腱。
在跟腱距其跟骨止点近端5毫米处横向切断，并切除一段5毫米长的跟腱组织。然后使用可吸收缝线连续缝合筋膜和皮肤，将大鼠置于热源下并进行监测，直至其完全恢复。在受体动物恢复期间，从每只实验用供体大鼠心脏采集20毫升全血，分别收集至含有3.2%缓冲柠檬酸钠的独立采血管中。
为获得富血小板血浆，将血液离心，然后使用塑料移液管小心地将上层含有PRP的组分转移至第二个塑料管中。测定所收集PRP的体积，并使用血液学分析仪测量血小板计数。
再次离心PRP，并小心地将上清液转移至新的塑料管中。PRP管中剩余的体积应约为达到每微升2.5 × 106 血小板所需体积的2/3。接下来，用移液器轻柔重悬血小板沉淀。测定该浓缩富血小板血浆的血小板计数，必要时加入适量自体贫血小板血浆，以达到目标浓度。
在室温下，每毫升富血小板血浆（PRP）加入50微升氯化钙激活约1小时。然后将血小板吸入配备21号针头的1毫升注射器中，将50微升血小板直接注射到每只动物的缝合部位。