一种用于筛选强效抑制寨卡病毒生长的干扰素的体外检测方法

取含有病毒易感的上皮细胞单层的孔板。

向检测孔中加入测试干扰素的系列稀释液。对照孔中不加干扰素。

在检测孔中，干扰素与细胞受体结合，触发抗病毒蛋白表达的信号级联反应。

孵育后，向所有孔中加入寨卡病毒。

寨卡病毒与宿主细胞受体相互作用并发生内吞作用。

现在，去除未吸附的病毒。向对照孔中加入培养基，向实验孔中加入含有额外干扰素的培养基。

孵育。在对照孔中，内化的病毒利用宿主细胞的机制形成新的病毒颗粒。

受感染的细胞裂解，释放出病毒颗粒，这些颗粒会感染并裂解其他细胞，从而在细胞单层中形成清晰的裂解区或空斑。

在经干扰素处理的细胞中，抗病毒蛋白可抑制病毒复制和细胞裂解，从而阻止蚀斑形成。

使用相差显微镜，计数各孔中的病毒蚀斑。

干扰素处理孔中斑块数量较少表明干扰素对寨卡病毒具有抗病毒活性。

在将 naive Vero 细胞接种于 12 孔板后 6 小时，以生物学重复的形式加入指定浓度的目的细胞因子。处理 12 小时后，进行寨卡病毒感染，并设置未感染的阴性对照孔。感染后 4 小时，将病毒接种液更换为含细胞因子的培养基，随后将细胞在 37°C 下继续孵育 44 小时。感染后 48 小时，使用相差显微镜计数病毒蚀斑，并在 40 倍放大倍数下获取感染细胞的代表性图像。