0 次观看 • 2:25 分钟 • July 8th, 2025
取一个含小胶质细胞单层的多孔板载玻片。
在测试孔中,用β-葡聚糖包被细胞。对照孔中不含β-葡聚糖。孵育。
在检测孔中,β-葡聚糖(一种病原体相关分子模式)与小胶质细胞上的特异性受体结合,引发β-葡聚糖的吞噬作用。
这会激活小胶质细胞,使其产生并释放活性分子(如活性氧和细胞因子)到培养基中。
从孔中收集含有生物活性分子的培养基,并过滤以去除碎片和β-葡聚糖。
将培养基在低温下冷冻,以保存生物活性分子的生物学活性。
接下来,解冻并加入培养基至含有脑癌细胞单层的多孔板中。孵育。
这些生物活性分子可激活细胞信号通路,抑制癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。
癌细胞增殖减少和凋亡增加表明,β-葡聚糖可促进小胶质细胞对脑癌细胞的抗肿瘤特性。
通过使用四种不同来源的β-葡聚糖,以每毫升0.2毫克的浓度处理BV-2小胶质细胞72小时,激活小胶质细胞 P. ostreatus, P. 担子菌 G. 灵芝 和 H. 刺猬属(erinaceus) 72小时后,用移液器收集上清液,并将剩余体积通过0.20微米针筒滤器过滤。随后,将上清液在-80摄氏度冷冻至少24小时。为用预激活的小胶质细胞条件培养基处理GL261细胞,将250微升经β-葡聚糖处理的小胶质细胞培养基加入至80%汇合度的GL261细胞中,共同孵育72小时。