脑片中多巴胺能神经元树突的膜片钳记录

从一个电生理学实验装置开始，其中固定好的脑切片浸没在含不同离子的人工脑脊液（aCSF）中。

该装置包括一个充满富钾溶液的膜片钳电极，该电极连接至记录电极和放大器。

向移液管施加正气压，以防止其堵塞。然后，将其置于多巴胺能神经元的树突附近，树突是接收信号的神经元突起。

膜的凹陷现象表明与树突的接近。

释放正压以产生负压，从而在移液管与树突膜之间形成紧密的密封。

在基线电压下记录初始离子运动作为动作电流。

灌注含有钠通道和钙通道阻断剂的 aCSF，以阻断相应通道，防止离子通过这些通道移动。

施加负电压以打开电压门控阳离子通道。

该通道允许钾离子进入神经元，从而增加动作电流，并提示多巴胺能神经元的树突受到刺激。

在此步骤中，将脑片转移至记录室。使用铂金丝环将脑片固定在记录室底部，并确保脑片质量良好，表面平滑且均匀。然后，选择一个具有在同一个平面上延伸较长距离的树突的神经元，并确保目标树突可连续追踪至一个界限清晰的胞体。接下来，用电极液填充膜片钳电极。

在细胞贴附模式下对树突进行膜片钳记录时，首先识别并聚焦于树突的某一部分。向玻璃微电极施加正压，并使用显微操作器将其缓慢下降。随后，将电极移至靠近细胞膜的位置，调节压力以在膜上形成一个小凹陷。接着，释放电极尖端的压力，在控制电极电阻的同时对树突进行封接。尽量获得大于1 GΩ的封接电阻，最佳范围为3至10 GΩ，以用于细胞贴附式记录。

随后，将移液管从膜上回撤数微米，以避免树突变形。此处观察到的动作电流代表黑质神经元的自发动作电位。为抑制动作电流，可在人工脑脊液（ACSF）中加入钙离子和钠离子通道阻断剂。然后，从0毫伏的保持电位施加-90毫伏的电压阶跃，以诱发超极化激活的阳离子电流。