使用多电极阵列分析小鼠原代螺旋神经节神经元的神经活动

0 次观看2:40 分钟 • July 8th, 2025

从多电极阵列(MEA)上的螺旋神经节神经元培养开始。

MEA由连接至触点的记录电极组成 通过 电路

清洗MEA以去除培养基,并干燥电极接触点,以避免记录过程中因水分引起的噪声。

将MEA安装在其支架上,并将其装入记录装置中。

MEA 电极与记录装置中的支架连接器对齐,用于传输电信号。

加入模拟细胞外环境的溶液,以维持神经元的正常生理活性。

开始记录。电极可检测神经元产生的自发信号或动作电位,这些信号在软件界面上以尖峰形式显示。

现在,对表现出自发性活动的一个电极施加电脉冲。

脉冲产生电场,刺激邻近电极上的神经元。

记录刺激依赖性活动。

最后,加入一种阻断电压门控离子通道的神经毒素,以阻止动作电位的产生。

记录信号以识别背景噪声。

经过共计 18 天的培养后,用先前在室温下配制的细胞外溶液清洗 MEA 培养物。然后,用一片纸巾擦干 MEA 芯片的电极接触点,并将 MEA 安装到 MEA 持载器上。最后,将 MEA 安装至记录装置中。

随后,加入 300 µL 细胞外溶液,静置 10 分钟,使系统稳定后再开始记录。现在,从所有电极记录两分钟的自发活动,并识别出有活性的电极。然后,确定对刺激有反应的电极。

为了排除刺激伪迹,使用同一电极进行10次刺激。如果培养物在10次中有至少8次产生反应,则可认为其对电极诱导的刺激具有阳性反应。为识别背景噪声,以1微摩尔浓度的河豚毒素(TTX)处理培养物,以阻断电压门控钠通道,随后记录2分钟。