大鼠脑内药物微量注射结合电生理记录

0 次观看3:28 分钟 • July 8th, 2025

首先使用一种包含电极的注射系统,即注射电极(injectrode)。该系统由一个微针和插入玻璃微量移液管内的银丝电极组成。

用含有染料的测试药物溶液填充注射电极,以便追踪药物在脑内的扩散情况。

将装有矿物油的注射器连接到注射电极上。擦去任何多余的液体。

将该注射电极固定在立体定位仪上,并将其连接至微泵系统。

将注射电极置于已麻醉大鼠颅骨开孔处的目标脑区。

逐渐降低注射电极以穿入目标区域。

在接收到确认最佳注射电极位置的特定电信号时,停止插入操作。

用温热的琼脂覆盖暴露的颅骨,以防止组织干燥。

让脑组织稳定。

注射所需剂量的药物。

记录电生理信号,以监测神经元对给药药物的反应活动。

通过以下步骤准备注射电极:首先,用5至10微升的注射器吸取矿物油。接着,将感兴趣的药物与染料混合于生理盐水中。此处,将0.5%芝加哥天蓝色与300微摩尔GABA混合。然后,先用1毫升注射器吸取上述制备的溶液,再用该注射器将溶液注入注射移液管中,完成移液管的填充。

移除注射器时,应轻轻按压柱塞,以免产生负压将注入电极中的溶液抽出。检查可能的漏液部位是否有液体渗出。用棉签吸去多余的液体,并重新检查是否漏液。接着,将装有矿物油的微量注射器连接到注入电极上。然后,用纱布擦去任何多余的溶液。

检查注射尖端。应能有少量溶液顺利流出。否则,说明其已堵塞或泄漏。现在,将注射电极牢固地安装到微泵系统上。然后,将注射电极移动至目标坐标位置,并将电极下降至视顶盖,该结构可通过记录视觉诱发电位来确认。

在降低电极的同时,通过以较低速率注射施加微小的正压,以防止堵塞。当到达目标结构时,停止注射。插入注射电极后,用温热的琼脂覆盖暴露的皮层,以防止干燥。电极最终定位后,等待30分钟,使电极周围组织稳定。随后,以每分钟40纳升的速率注射400至800纳升溶液,直至上丘神经元活动失活。

在注入抑制性溶液期间,电极应显示出尖峰的减少。