0 次观看 • 3:37 分钟 • July 8th, 2025
将固定的前额叶皮层脑片置于电生理记录装置的记录室中，浸入人工脑脊液（aCSF）内。
这种人工脑脊液含有钠离子通道阻断剂，可抑制神经元中的钠通道。
将一支充满γ-氨基丁酸（GABA）的吹注微管置于突触后神经元上方。
将一支充满离子溶液并带有电极的记录微电极靠近同一神经元。
施加微弱负压，以在神经元膜的小片区域上形成紧密封接。
然后施加强负压以破坏膜片，从而进入神经元内部。
释放GABA（一种抑制性神经递质），其与突触后神经元上的配体门控氯离子通道结合。
这会打开通道，允许氯离子进入神经元，从而产生抑制性突触后电流。
在恒定电压下，记录突触后电流。抑制性突触后电流的增加反映了 GABA 在抑制神经元活动中的作用。
使用巴氏移液管将脑切片转移至记录室，移液管的细端需剪至与切片大小相匹配。接着，将铂金切片固定锚置于切片上方，以将其固定在平台上。随后，用内液填充记录微电极，用10微摩尔、50微摩尔和100微摩尔的GABA或作为溶剂对照的aCSF填充喷吹微电极。
为防止电极被碎屑堵塞，在将记录电极浸入aCSF之前，使用1毫升注射器施加轻微的正压。在显微镜下，调整记录电极和喷射微管的位置，使其尖端位于显示器中央。随后，识别目标神经元。在逐渐降低喷射微管的同时调节显微镜焦距，将其以45度角置于记录神经元上方。
将喷射微管尖端与目标神经元之间的距离保持在20至40微米范围内。缓慢而小心地用记录电极接近神经元，然后释放正压。通过连接至电极夹持器的管路施加微弱且短暂的负压，以形成吉欧姆封接。将电压维持在零毫伏。
形成吉欧姆封接后，手动或自动补偿快速和慢速电容。随后，通过管道施加短暂而强烈的负压，以进入全细胞记录模式。接着，在电压钳制模式下记录诱发电流抑制性突触电流（IPSC）。
通过由主控八步电压发生器控制的喷射微电极输送单次或成对的GABA喷射。调整喷射持续时间以获得最佳诱发电流结果，并测量诱发电流。