磁刺激模式化神经元培养物

取一个培养皿，其中含有细胞外记录液，并将带有神经元环状培养物的图案化盖玻片放入其中。

这些细胞预先与一种钙敏感的荧光染料共孵育，以检测细胞内钙水平。

将培养皿置于荧光显微镜载物台上。

将连接至磁刺激仪的环形磁线圈同心放置于培养物上方适当距离处，以确保最佳刺激效果。

使用磁刺激器，通过线圈施加高电压和大电流，以产生随时间变化的磁场。

该磁场在神经元中诱导产生电场，从而引发动作电位。

当动作电位到达神经末梢时，会激活电压门控钙通道，使钙离子内流进入细胞，从而在突触处释放神经递质。

此次释放通过突触连接促进信号向邻近神经元的传递。

由于钙离子内流，这些离子会与细胞内钙离子敏感性染料结合，从而增强荧光信号，表明神经元活动。

开始磁刺激时，将呈圆形图案生长的神经元培养物置于显微镜下。使用标准的圆形磁刺激线圈及配套的刺激器进行刺激，这些设备均可商业获得。

为了使用非标准磁场强度刺激培养物，将自制的磁刺激线圈连接到定制的刺激器上。然后，借助激光指示器，将培养物的中心与线圈的中心对齐，以确保成功刺激。

调整线圈位置，使其保持在培养物中心上方约五毫米处。待刺激线圈准确定位后，将刺激器充电至最高五千伏的电位。随后，使用高电流、高电压开关，将高电压和大电流通过刺激线圈放电，产生一个磁脉冲，以刺激培养神经元的活动。