分析转基因斑马鱼幼虫中由猎物引发的神经元活动

从一个行为记录装置开始，其中包含一条被麻醉并固定在低熔点琼脂糖中的转基因斑马鱼幼体。

幼虫的中脑顶盖前区和下丘脑的下叶含有表达荧光钙指示剂的改良神经元。

移除幼虫头部周围的琼脂糖，并用水清洗以去除任何残留的琼脂糖。

将一个草履虫作为猎物放置在幼虫附近。

将记录室转移至荧光显微镜下。

当猎物游动时，幼虫的眼睛会探测到猎物，并将信号传递至参与猎物检测的视顶盖和下丘脑区域。

这会打开这些神经元中的钙离子通道，使钙离子进入并与钙指示剂结合，从而产生荧光发射。

记录延时成像，以检测沿猎物游动路径的神经元荧光强度，并生成颜色图谱。

在此图中，箭头代表猎物的运动轨迹：黑色箭头表示无神经元兴奋，而彩色箭头表示由猎物运动引发的神经元兴奋增强。

根据文本方案培养草履虫并麻醉斑马鱼幼体后，将幼体放入2%低熔点琼脂糖中，并立即去除多余的琼脂糖，使琼脂糖表面呈轻微凸起状。使用解剖针迅速将幼体调整为直立位置。

然后，使用手术刀在琼脂糖上做几个小切口，以去除斑马鱼头部周围的琼脂糖，从而为草履虫的游动留出空间。通过轻轻将系统水倒入记录室，小心去除残留的琼脂糖。接着，将一个草履虫放入记录室中，作为视觉刺激物。

然后，将记录室置于配备科学级CMOS相机的落射荧光显微镜下，并选择2.5倍物镜。启动所配相机的图像采集程序。点击序列窗格，并在该窗格中选择硬盘记录。在扫描设置部分，将帧数设置为900或根据需要设定其他总帧数。

在采集面板中，将曝光时间设置为30毫秒，像素合并设置为2×2。点击采集面板上的实时预览按钮，在相机视野中找到幼虫并进行聚焦，然后点击停止实时预览，再点击开始按钮。将视频以.cxd格式保存，并根据文本方案分析数据。