使用全细胞膜片钳研究荧光神经元的兴奋性

0 次观看3:06 分钟 • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

在灌注aCSF的记录室中取出固定化的转染小鼠冠状切片。

该切片包含表达靶酶和荧光蛋白的稀疏锥体神经元群。

组装一个记录移液器,其中包含细胞内溶液和连接到用于测量神经元信号的放大器的电极。

显微镜识别目标组织区域并定位荧光神经元。

移液器施加正压以防止堵塞并将其推进到目标神经元。

正压在接触时在神经元膜上引起轻微的压痕。

释放压力,在膜和尖端之间形成紧密的密封。

将保持电位设置为恒定的负值以稳定神经元。

施加短暂的负压以破裂膜,将细胞质连接到移液器内部并建立全细胞配置。

切换到电流钳位模式并施加正电流脉冲,产生指示神经元兴奋性的动作电位。

使用巴斯德移液器或小刷子将切片转移到记录室。用竖琴按住切片,以每分钟 2 毫升的速度用 ACSF 灌注。要修补GFP阳性神经元,请通过显微镜以10倍定位感兴趣区域。然后,使用 60 倍物镜找到 GFP 阳性细胞。

接下来,用细胞内溶液填充记录电极。随后,将玻璃移液器放入移液器支架中。然后,将移液器吸头放入浴液中并专注于吸头。移液器进入浴槽后,通过背压控制系统施加正压。

视觉引导下接近感兴趣的细胞,同时保持移液器中的背压。当细胞表面出现小凹坑时,释放压力。此时,可以形成电阻大于 1 GHz 的紧密密封。否则,施加轻微的负压以促进它。

形成密封时,将保持电压钳位置于负 60 毫伏。一旦千兆欧密封形成,施加抽吸脉冲以破裂细胞膜并进入全细胞模式。进入全电池模式后,从电压钳位切换到电流钳位模式并开始记录。

07:23

在脑片全细胞膜片钳记录

相关视频

0 观看次数

08:39

全细胞贴片记录用于电泳生理测定通道视紫质中的离子选择性

相关视频

0 观看次数

10:52

全细胞膜片电生理方法对突触倍数的评价

相关视频

0 观看次数

03:42

全细胞补丁夹钳电生理学:研究神经元电特性的方法

相关视频

0 观看次数

03:12

通过膜片钳方法建立全细胞配置

相关视频

0 观看次数

03:05

小鼠海马切片中神经元的光刺激和全细胞膜片钳记录

相关视频

0 观看次数

03:45

脊髓切片的明胶质神经元中的全细胞膜片钳记录

相关视频

0 观看次数

08:58

全细胞膜片钳红外神经刺激机制的调查

相关视频

0 观看次数

11:34

具体的感觉神经元的人群离子通道的表达研究鉴定

相关视频

0 观看次数

08:44

星爆无长突细胞的膜片钳在Deafferentated小鼠视网膜的平板安装准备

相关视频

0 观看次数

最后更新:1 八月 2026