使用穿透式微电极阵列记录展开的海马组织中的神经活动

取一个含有穿透性微电极阵列（PMEA）的记录室，该阵列用于记录神经组织的电信号。

使用三通接头将入口连接至含有含氧人工脑脊液（aCSF）的瓶子以及含有含氧人工脑脊液加4-氨基吡啶（4-AP）的瓶子。

将出口连接至真空管。

将入口与三通阀之间的管道加热至生理温度。

在进液口和出液口关闭的情况下，将未展开的海马体转移至腔室中。

在显微镜下，将海马体置于 PMEA 上。

从室中移除溶液。

使用组织锚定装置将组织固定在 PMEA 电极上。

打开进液口和出液口，以启动人工脑脊液（aCSF）的流动。

将组织与 aCSF 共同孵育，以促进神经元的适应。

然后，灌注含有4-AP的aCSF。4-AP可阻断神经元的钾离子通道，从而延长动作电位的持续时间。

PMEA 捕获与海马神经元增强的神经放电成比例的电信号。

在此步骤中，取一个瓶子加入正常 aCSF，另一个瓶子加入 4-AP aCSF。从实验开始起，用 95% 氧气和 5% 二氧化碳对溶液进行通气。使用三通阀连接器控制实验过程中选择的溶液。

接下来，将一根真空管连接到灌流室的出口，以将溶液引流至废液容器中。在将溶液送入记录室之前，需对输液管路进行加热，并使其保持在35摄氏度的恒温条件下。关闭记录室的进液口和出液口后，使用自制的玻璃移液滴管将展开的海马体转移至记录室中。

在显微镜下，将展开的海马体放置，使其明显的一面朝下，CA3 区朝外，CA1 区朝向研究人员。使用真空移液器从记录室边缘小心吸除室内的溶液，直至室腔干燥，组织贴附于阵列上。

然后，小心地将定制的组织固定锚置于组织上方，以将展开的海马体固定在阵列上。用几滴溶液重新填充记录室。逐渐打开进液口和出液口，调节流速至静脉输液室中每秒约两滴。

将组织置于记录室中，用正常 aCSF 孵育约 1 分钟。然后将灌流液切换为含 4-AP 的 aCSF，并适当调节流速。在记录前，用含 4-AP 的 aCSF 孵育组织约 5 至 10 分钟。