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将一只已暴露颅骨的麻醉小鼠固定在立体定位仪上。该小鼠右侧大脑皮层已被注射表达突变型肌动蛋白切割蛋白的病毒。
将皮层电极拧入注射部位。
根据后侧电极、参考电极和固定螺钉的位置,垂直标记并钻孔颅骨。
使用消毒剂对部位进行消毒,并进行阻断以防止出血。
以相同的钻孔角度插入螺钉和电极,并在它们之间的空隙处涂抹牙科水泥。
现在,利用光线使水泥固化。
用牙科水泥覆盖电极和螺钉的基部,再次进行光照固化。用丙烯酸水泥固定装置,缝合皮肤。
将电极的金线连接到连接器插针上。
用丙烯酸酯胶水覆盖连接器空间。
让小鼠恢复。恢复后,记录大脑皮层对病毒注射产生的信号反应。
进行电极植入时,使用直型Kelly止血钳缓慢旋入一个带有直金丝的皮层电极,将其沿AAV注射孔的垂直轴方向植入,确保至少有2.5毫米的螺纹部分留在颅骨外,以尽量减少对硬脑膜和大脑皮层的损伤。
用笔标记参考电极的位置:位于中线右侧 2.6 毫米,前囟后方 0.7 毫米;标记后部皮层脑电图电极的位置:位于中线右侧 1.5 毫米,人字缝前方 1.5 毫米;并在左半球标记三个固定螺钉的位置,无特定坐标,但应尽可能彼此远离,并远离皮层脑电图电极。
使用钻头在其他电极和螺钉标记位置处,垂直于颅骨表面小心钻孔,并用10%聚维酮碘溶液冲洗钻孔后的颅骨。
在安装螺钉前,用卷成小团的精细擦拭纸堵住孔洞,以防止出血和污染;使用直型Kelly镊子将螺钉沿钻孔时相同的角度插入钻孔中。在螺钉内部环形空间的中心位置滴加少量牙科水泥。在遮盖动物眼睛后,照射光线三至五分钟以固化水泥,并使用额外的牙科水泥覆盖皮层电极的基部及锚定螺钉,形成冠状轮廓。
再照射三到五分钟光线后,用丙烯酸树脂水泥填充拼接区域的中心,并移除手术钳。
使用合成可吸收单股缝线缝合蒙太奇前后部位的皮肤,确保颅骨不外露;用弯头镊子夹住连接器,使其位于蒙太奇上方,仔细将电极的金线与连接器的插针对齐。随后,迅速将每个电极末端焊接到对应的单个连接器插针上。
将小鼠从固定架上取下后,用丙烯酸水泥覆盖连接器与头部之间的空隙,称重后将小鼠放入带有非网状盖子的清洁笼中,并置于加热垫上。