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神经科学
0 次观看 • 3:26 分钟 • July 8th, 2025
将麻醉后的小鼠固定于仰卧位。
将刺激电极皮下插入,使其与支配前肢肌肉的神经对齐。
将记录电极皮下插入上臂肌肉上方,参考电极插入足垫,接地电极置于侧面。
施加电脉冲以刺激前肢神经元,诱导正离子内流并产生动作电位。
动作电位在神经肌肉接头处引发兴奋性神经递质的释放,从而导致肌纤维的激活和收缩。
记录所有肌纤维的综合反应——复合肌肉动作电位(Compound Muscle Action Potential,CMAP)。
施加最大刺激以确保所有肌纤维均被刺激。
结束刺激,并确定潜伏期,即刺激开始与反应之间的时间延迟。
潜伏期延长表明由于神经元脱髓鞘导致传导速度下降。
测量复合肌肉动作电位(CMAP)的幅度;幅度降低提示功能性神经元的丢失。
为了在前肢测量复合肌肉动作电位(CMAP),将小鼠仰卧放置在加热垫上,并使用胶带将两侧前肢向外伸展固定于身体两侧。接着,将刺激电极的5毫米部分置于前肢两侧皮下,注意不要刺破深层肌肉,使其与臂丛神经对齐。
然后,将记录电极置于肱二头肌上方的皮下。接着,将参考电极以30度角插入足垫表面3毫米,并将接地电极插入小鼠体侧的皮下。
在此设置中,电极彼此靠近。防止电极相互接触,因为这会扭曲记录结果。
以每秒一个脉冲、刺激持续时间为0.1毫秒的条件刺激所有轴突。为获取数据,按下控制器单元上的重复刺激按钮开始刺激,并旋转强度控制旋钮以增加刺激强度。
为了达到超强刺激,通过旋转强度控制器旋钮逐步增加刺激,直至复合肌肉动作电位(CMAP)反应的幅度不再增加。在此基础上,再将刺激强度提高20%,以确保CMAP幅度已达到最大反应。通过再次按下重复刺激按钮来结束刺激。
使用标记工具在记录中标注以下时间点:反应起始点、最大正向峰值和最大负向峰值。刺激的起始时间由软件自动确定。
通过刺激开始至反应开始之间的时间延迟来确定潜伏期。利用潜伏期评估轴突的脱髓鞘情况。从负向波峰到正向波峰的最大值之间测量波幅,并利用波幅的大小来关联功能性轴突的数量。