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将麻醉的小鼠固定在仰卧位。
皮下插入刺激电极,将它们与支配前肢肌肉的神经对齐。
将记录电极皮下插入上臂肌肉顶部,参比电极插入步行垫,将接地电极插入侧面。
施加电脉冲刺激前肢神经元,诱导正离子流入和动作电位的产生。
动作电位在神经肌肉接头诱导兴奋性神经递质释放,导致肌纤维激活和收缩。
记录所有肌肉纤维的综合反应——复合肌肉动作电位,或 CMAP。
施加最大的刺激以确保刺激所有肌肉纤维。
结束刺激并确定潜伏期,即刺激开始和反应之间的时间延迟。
潜伏期增加表明由于神经元脱髓鞘导致传导速度降低。
测量 CMAP 振幅;幅度减小表示功能性神经元丢失。
要测量前肢的 CMAP,请将鼠标仰卧位放在加热垫上,并使用胶带将两个前肢伸展到身体两侧。接下来,将 5 毫米的刺激电极皮下放置,不要刺穿前肢两侧的下层肌肉,以与臂丛神经对齐。
然后,将记录电极皮下放置在肱二头肌上方。随后,将 3 毫米的参比电极以 30 度角放置在步行垫上,并将接地电极皮下插入鼠标侧面。
在此设置中,电极彼此非常接近。防止电极相互接触,因为这会扭曲记录。
使用每秒一个脉冲刺激所有轴突,刺激持续时间为 0.1 毫秒。要获取数据,请通过按下控制器单元中的循环刺激按钮开始刺激,然后转动强度控制器旋钮以增加刺激。
要达到超最大刺激,请通过转动强度控制器旋钮施加增加的刺激,直到 CMAP 响应的幅度停止增加。从那里进一步增加 20% 的刺激,以确保 CMAP 幅度达到其最大响应。再次按下循环刺激按钮结束刺激。
使用标记工具指示记录中的以下点;响应的起始、最大正峰值和最大负峰值。刺激的启动由软件自动确定。
将潜伏期确定为从刺激开始到反应开始的延迟。使用潜伏期来评估轴突中的脱髓鞘。测量从最大负峰到最大正峰的幅度,并使用幅度的大小来关联功能轴突的数量。
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