在固定斑马鱼幼体中监测传入神经元的电信号

在电生理实验装置中，将一条固定且麻痹的斑马鱼幼鱼置于充满细胞外溶液的记录室中。

用含有离子的细胞外液填充传入微电极，该溶液可提供电导性以记录神经元活动。

将其组装到含有记录电极的显微操作器中，该电极连接至放大器以记录信号。

施加正向气压以防止移液管堵塞。

沿侧线神经移动移液器尖端，并将其置于含有传入神经元胞体簇的传入神经节附近。

这些神经元的细胞突起与位于侧线上的毛细胞相连，后者能够感知水流运动。

然后施加轻柔的负压，以在微吸管与传入神经节之间形成松散的封接。

记录来自传入神经元的电信号，这些神经元接收来自固定幼虫毛细胞的感觉输入。

用宽口移液管将斑马鱼幼鱼固定并转移至35毫米的培养皿中。尽可能去除周围的溶液。将幼鱼浸入10微升0.1% α-银环蛇毒素中，孵育约5分钟。用细胞外溶液清洗麻痹的幼鱼10分钟。然后，使用移液管将幼鱼从细胞外溶液浴中转移至硅胶底部的记录培养皿中。

在体视显微镜下，用尖头镊子轻轻夹住幼鱼，将其置于硅胶垫中心上方，身体侧面向上，头尾方向自左向右。用尖头镊子将刻痕针垂直插入硅胶垫，穿过幼鱼肛门正背侧的背索。将第二根针插入尾部末端附近的背索，第三根针插入鳔背侧的背索。第四根针插入耳泡时，在针进入包埋介质的过程中施加轻微旋转。

施加轻微旋转时，观察肩胛骨与耳囊之间的组织，以显露传入神经元胞体的聚集区域。将固定好的幼体置于微分干涉相差（DIC）显微镜固定载物台的10倍物镜下，调整肌节间裂隙的方向，使其与左侧载物台移动方向平行。

将接地线放入浴液中，并确保其连接至左侧头级放大器。用30微升细胞外液填充传入神经记录电极，并将其插入右侧头级放大器的移液器固定器中。然后，在施加由气动换能器产生的正压的同时，将其缓慢浸入培养皿的溶液中。

找到电极并将电极尖端移至标本上方。使用显微操作器，降低传入神经电极的尖端，直至其位于肩带骨（cleithrum）上方并保持位置。将放大倍数增加至40倍浸油镜，定位后侧线神经与肩带骨的交汇处。将电极尖端移至传入神经节上方，缓慢下降移液管，直至尖端接触上皮层。轻柔地调整电极位置，使电极尖端的整个周缘均与传入神经节接触。