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神经科学
0 次观看 • 4:42 分钟 • July 8th, 2025
以立体定位仪固定一只已麻醉的大鼠,并暴露其颅骨。
利用颅骨上的参考点进行校准并标记目标坐标。
在标记的位置钻孔。
清除碎屑并切开大脑的外层。
经常用生理盐水冲洗孔洞,以防止干燥。
钻额外的孔并用锚定螺钉固定电极。
安装参考电极和电生理记录电极,并用丙烯酸树脂固定。
根据大脑中的多靶点位置,将钨丝微电极排列在支架上。
多个电极可实现从多个目标位点同步记录脑部活动。
根据颅骨上的参考点,放置钨丝微电极。
轻轻地将它们插入大脑。
设置记录软件以检测脑部活动。
将电极降至目标深度并开始记录数据。
在显微镜下,使用标准的大鼠立体定位对准工具,将指定的尖端校准至前囟,并调节门齿杆,直至工具上前囟和后囟的指定点同时接触颅骨。使用带有套管的立体定位仪,将其校准至前囟,然后计算颅骨上所有钻孔的位置。
然后,通过仔细刮擦颅骨或使用外科彩色标记笔,在颅骨上标出需要钻孔的位置。接着,使用微型钻头小心地钻出所有直径约为1毫米的孔。对于丘脑底核(STN)和黑质网状部(SNr),钻一个大约2毫米×3毫米的共用孔。
取一根细针头,将其尖端弯曲成两个钩状。然后用这两个钩清除钻孔中的任何碎屑,并仔细剪开并移除共同的丘脑底核/黑质网状部钻孔处的硬脑膜。之后,用生理盐水冲洗钻孔。
每15分钟向钻孔处滴加一滴生理盐水,以防止脑组织和硬脑膜干燥。然后取一微型钻头及配套的不锈钢微型螺钉,在小脑上方参考硬膜外电极钻孔之间钻孔,并旋入微型螺钉。
接下来,使用精细镊子引导电极尖端,将其直接滑入颅骨下方的钻孔中。使用双组分牙科丙烯酸树脂固定所有硬膜外电极。注意不要覆盖前囟点,也不要影响共同的丘脑底核/黑质网状部(STN/SNr)钻孔。
然后,将装有钨丝微电极的预制电极架插入立体定位仪。将最腹侧的电极校准至前囟点,以定位丘脑底核(STN)。调整至计算得出的共同STN/SNr孔上方位置,并将电极缓慢下降至脑组织中。
确保钨丝微电极平稳地进入大脑。在此步骤中,设置记录软件,例如带通滤波器,并放大原始数据信号。然后,使用具有适当参数的在线局部场电位(LFP)和动作电位滤波器。
对于所有滤波器,均使用巴特沃斯型滤波器。设置在线尖峰信号分选的阈值。大多数记录软件均支持设置尖峰阈值,该阈值为信号幅度超过此值时即被软件标记为尖峰信号的幅值。接下来,缓慢将钨丝微电极下降至丘脑底核(STN)上方1毫米处,并在必要时等待信号稳定。