使用光纤光度法记录自由活动小鼠的神经活动

0 次观看2:27 分钟 • July 8th, 2025

从一只植入了光纤套管且可自由活动的小鼠开始。

将光纤连接线的一端连接至套管,另一端连接至激发光源。

小鼠在下丘脑外侧区(LHA)神经元中表达一种带有绿色荧光蛋白标记的遗传编码钙离子指示剂(GECI)。

植入的光纤接触外侧缰核(LHb)区域,该区域是LHA轴突的终止部位。

在GECI的最佳激发波长下进行激发,并记录基线信号。

现在,对小鼠反复施加气流刺激,以诱发其厌恶应激反应。

该刺激可触发LHA轴突末梢的动作电位,打开电压门控钙通道,使钙离子内流。

细胞内钙离子与GECI结合,诱导其发生构象变化,从而增强绿色荧光的发射。

可视化光学信号。

小鼠在受到气流刺激时荧光信号增强,证实了LHA-LHb通路在传递厌恶信号中的作用。

首先用肉眼和微型光纤显微镜检查光纤跳线末端的光纤。如果光纤表面有划痕,则使用细粒度的光纤抛光膜对光纤进行重新抛光。然后,用70%乙醇和棉签清洁光纤跳线的远端。使用70%乙醇和棉签清洁光纤插管。

使用黑色热缩管包裹的陶瓷分体套管将光纤跳线的卡套端连接到植入的光纤上。连接时,确保套管紧固。让动物恢复几分钟后,开始记录光信号并运行实验。记录过程中,密切观察实时信号轨迹,以确保记录质量,并注意信号是否出现跳跃,这可能表明套管未完全紧固。