小鼠脑切片中重编程神经元的电生理记录

将固定好的经基因工程改造的小鼠冠状脑切片置于记录室中，并用充氧的缓冲液灌流。

该切片包含纹状体区域，其中的中间神经元由少突胶质细胞前体细胞重编程而来，并通过中间神经元标记物和荧光蛋白表达进行标记。

组装一支记录电极，其中包含浸入细胞内溶液的电极。

在显微镜下识别荧光中间神经元。

保持移液管内的正压，将其推进至目标中间神经元，接触细胞膜。

施加负压以形成高阻封接。

施加负压脉冲以破裂膜，形成全细胞构型。

将中间神经元的膜电位维持在一个恒定的负值。

施加短暂的递增电流，打开离子通道并改变膜电位，从而引发动作电位。

最终，膜电位恢复至静息电位。

观察这些在电流注入后膜电位的变化，表明神经元成熟及重编程成功。

将一个组织切片转移至用于电生理记录的记录室后，将玻璃移液管安装到记录电极上，并将其缓慢浸入溶液中。仔细检查电极的电阻。然后，用移液管缓慢接近重编程的细胞，同时在电极内保持轻微的正压，以防止尖端堵塞，并在形成膜片之前确认细胞为GFP阳性。

当细胞形成封接后，将细胞钳制在-60至-70毫伏的电流钳模式下，并以10皮安为增量，注入持续500毫秒、范围从-20至+90皮安的电流，以诱导产生动作电位。这表明神经元已成熟且重编程成功。