JoVE 实验百科全书
神经科学
0 次观看 • 2:44 分钟 • July 8th, 2025
将小鼠海马-内嗅皮层切片固定在浸没式记录室中。
持续以恒定温度灌注含氧人工脑脊液(ACSF),以维持组织活性。
将充满电解质溶液的刺激电极置于海马CA3区的辐射层内,该区域含有接收来自内嗅皮层信息的神经元。
将充满人工脑脊液(ACSF)的记录电极插入CA1区的锥体细胞层,该区域由与CA3区轴突投射形成突触的神经元组成。
使用刺激移液管,施加电脉冲以触发突触前CA3神经元的动作电位。
动作电位引发神经递质的释放,这些神经递质与突触后CA1神经元上的受体结合。结合后引起离子内流,导致膜电位发生变化。
通过记录电极在细胞外记录多个突触后CA1神经元膜电位的综合变化,这种变化称为局部场电位(local field potential, LFP)。
为记录局部场电位,将400毫升烧杯中装入通入碳氧混合气体的ACSF,并将泵管一端插入烧杯中。打开蠕动泵,流速设为每分钟8至10毫升,使ACSF从400毫升烧杯流入加热储液槽,再从储液槽流入记录室,温度维持在32摄氏度。
接下来,短暂夹闭管路,并关闭泵以暂停灌流。使用精细镊子,用盖玻片的一角将脑组织切片转移至记录室,切片朝下。移去盖玻片,使切片浸没在记录室中,并使用固定网(harp)固定切片。
使用手动显微操作器,将充满氯化钠溶液的刺激电极尖端以30至45度的角度缓慢插入脑片表面。然后,使用第二个显微操作器,将充满人工脑脊液(ACSF)的局部场电位记录电极尖端以30至45度的角度缓慢插入目标区域,并根据标准操作流程记录样本的局部场电位。