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将麻醉后的小鼠固定在立体定位仪上。
对剃毛后的皮肤进行消毒,用手术巾覆盖小鼠,沿中线做切口以暴露颅骨。
在特定的立体定位坐标处的颅骨上钻两个孔。
准备一个带有四针插头并连接至不锈钢导线的记录电极单元。
使用两根带螺丝的导线作为脑电图(EEG)电极,以测量大脑的电活动。
使用另外两根导线作为肌电图(EMG)电极,以测量肌肉的电活动。
将脑电图电极拧入孔中,并将电极组件固定在颅骨上。
将肌电图电极插入颈部肌肉中。
用缝线闭合切口,并让小鼠恢复。
将小鼠转移至隔音录音室。
将电极组件连接至记录电缆,并将其与放大器相连。
记录小鼠的脑电图(EEG)和肌电图(EMG)信号,以分析不同的睡眠阶段和清醒状态。
开始前,将所有手术器械在热珠灭菌器中进行灭菌。通过脚趾夹捏确认小鼠已麻醉后,剃除头部和颈部的毛发。
接下来,将小鼠固定在立体定位仪框架上,并用两侧耳杆固定头部。然后,在眼睛上涂抹眼用软膏以防止干燥。接着用酒精和含碘消毒剂清洁已剃毛的皮肤。
然后,使用手术刀沿中线切开以暴露颅骨,并用夹子将皮肤固定于两侧,以保持手术区域开放。使用0.8毫米钻头的碳化物切割器钻两个孔:一个孔位于额叶皮层区域上方,另一个孔位于右半球顶叶区域上方。
接下来,使用钟表匠螺丝刀将不锈钢脑电图(EEG)记录螺钉旋入孔中。将螺钉旋入约两到两圈半,以使其位于大脑皮层上方的硬脑膜外位置。螺钉插入后不应晃动,这一点非常重要。
现在,将电极组件固定在颅骨上,针脚朝上。电极必须垂直贴附。使用棉签辅助固定电极位置,先用氰基丙烯酸酯胶水将电极粘牢,再用牙科水泥加固。
接下来,在斜方肌上制作小孔,并将肌电图电极插入这些孔中。然后用直径为0.1毫米的丝线缝合皮肤。现在将小鼠从立体定位仪上取下,并放置在加热垫上。
给小鼠腹腔注射氨苄青霉素和美洛昔康,并监测小鼠直至其恢复胸卧位。随后将小鼠单独饲养。
植入电极一周后,将小鼠转移至隔音记录室内的实验笼中。将小鼠头部的脑电图/肌电图(EEG/EMG)电极组件固定到连接滑环的记录电缆上。
将模数转换器电缆连接到与滑环相连的脑电/肌电信号滤波放大器。使用模数转换器将信号转换为128赫兹的数字信号,最后将信号记录到计算机中。
将小鼠在记录室中适应2至3天。启动脑电图(EEG)/肌电图(EMG)记录软件。首先,点击数据文件信息标签,然后勾选文件名旁边的复选框。输入文件名并点击保存。随后,在记录条件标签中,选择所有需要记录的EEG/EMG通道,并在此标签下选择采样频率。
现在在通道信息选项卡中,检查所选通道是否正确显示。确认无误后,首先选择定时设置选项卡,开始记录。然后,单击监测以显示脑电图(EEG)和肌电图(EMG)。如果信号显示正常,则在主定时器区域设置记录开始和结束的时钟时间。随后,单击监测按钮以开始记录。