在 Drosophila 幼虫神经肌肉接头记录突触电流

将一个含有已解剖的幼虫且肌肉和神经分支已暴露的培养皿置于显微镜载物台上，该幼虫为黑腹果蝇（Drosophila）。

将参考电极插入培养皿中的浴液内。

用等渗溶液填充记录电极。

使用显微操作器，将该电极置于由运动神经元支配的腹部肌肉上方。

将电极尖端置于突触小体上，突触小体是轴突末端含有神经递质的结构。

持续记录微小兴奋性突触电流（mEJCs），即对自发性神经递质释放的反应。

mEJC 振幅的正确范围证实了电极位置的准确性。

接下来，将刺激电极放置在支配目标肌肉的轴突附近。

施加负压将轴突吸入电极内。

逐渐增加刺激电流以诱导产生动作电位。

这会触发轴突在神经肌肉接头处释放神经递质，这些神经递质被记录为突触电流。

将含有标本的培养皿置于显微镜载物台上。将参考电极插入浴液中。用HL3溶液填充记录电极。在10倍物镜下，通过显微操作器将电极浸入浴液，并将其置于第2、3或4腹节的第6和第7块肌肉上方。

接下来，将物镜切换至60倍，使用落射荧光或微分干涉（DIC）光学系统对准目标区域。将电极尖端置于突触小结上方，然后非常轻柔地将电极压向肌肉，因为过大的压力可能会损伤神经肌肉接头（NMJ）或诱发自发性突触活动增加。

接下来，打开放大器、AD 板和计算机。然后，在放大器上选择电压钳模式。启动数据采集软件，选择无间隙模式，并在计算机屏幕上观察微小兴奋性突触电流（mEJCs）的出现。确保 mEJCs 的幅度在 0.2 至 0.7 纳安之间。

在显微操作器的视觉控制下，将刺激电极放置在支配第2至第4腹节的轴突附近。通过拉动连接至电极夹持器的注射器活塞施加负压，使轴突被吸入电极内部。

接下来打开刺激器。旋转隔离单元上的旋钮，将电流调至零，然后缓慢增加电流，直至出现终板电流（EJCs）或达到阈值。在超阈值条件下进行刺激，刺激电流约为观察终板电流所需阈值电流的两倍。