评估脑血管内皮细胞中的线粒体功能

从培养基中的脑血管内皮细胞（CVE细胞）开始。

CVE细胞是高能量需求的细胞，它们排列在脑血管内壁，对脑生理功能至关重要。

将细胞接种至细胞外通量细胞培养板中，孵育以促进细胞贴壁。

用所需 pH 的细胞外通量分析培养基替换原培养基。

在无二氧化碳条件下孵育，以维持 pH 值。

接下来，取一个细胞外通量传感器微孔板，其中包含传感器和底部板。

向孔板中加入校准溶液，并在无二氧化碳条件下孵育以水合传感器。

这些传感器可测量细胞外环境中氧浓度的变化，从而反映线粒体活性。

然后，将微流控芯片装入生物分析仪中，并校准传感器。

将底板更换为含有细胞的培养板。

测定 CVE 细胞的线粒体功能。

经过适当次数的传代培养后，将1.6 × 10⁴个细胞接种至96孔细胞外通量培养板中，每孔加入80 µL完全培养基，然后将培养板置于含5%二氧化碳的37 °C培养箱中。

在线粒体功能评估实验前一天，将150微升细胞外通量校准液加入细胞外通量传感器板中进行水合，并将该板在37摄氏度、无二氧化碳条件下孵育过夜。

第二天早上，使用洗板机将细胞培养基更换为 pH 7.0 的细胞外通量分析培养基，然后将细胞在 37 摄氏度、无二氧化碳条件下孵育 30 至 60 分钟。待细胞达到平衡后，将水化好的微孔板插入生物分析仪中，点击 开始 按钮以启动校准。

校准结束时，单击 解锁 盒式装置 提示移除芯片底板，加载细胞板，然后打开数据文件，从生物分析仪获取速率值并导出至电子表格文件。