评估脑血管内皮细胞中的线粒体功能

0 次观看2:43 分钟 • July 8th, 2025

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从培养基中的脑血管内皮细胞(CVE细胞)开始。

CVE细胞是高能量需求的细胞,它们排列在脑血管内壁,对脑生理功能至关重要。

将细胞接种至细胞外通量细胞培养板中,孵育以促进细胞贴壁。

用所需 pH 的细胞外通量分析培养基替换原培养基。

在无二氧化碳条件下孵育,以维持 pH 值。

接下来,取一个细胞外通量传感器微孔板,其中包含传感器和底部板。

向孔板中加入校准溶液,并在无二氧化碳条件下孵育以水合传感器。

这些传感器可测量细胞外环境中氧浓度的变化,从而反映线粒体活性。

然后,将微流控芯片装入生物分析仪中,并校准传感器。

将底板更换为含有细胞的培养板。

测定 CVE 细胞的线粒体功能。

经过适当次数的传代培养后,将1.6 × 104个细胞接种至96孔细胞外通量培养板中,每孔加入80 µL完全培养基,然后将培养板置于含5%二氧化碳的37 °C培养箱中。

在线粒体功能评估实验前一天,将150微升细胞外通量校准液加入细胞外通量传感器板中进行水合,并将该板在37摄氏度、无二氧化碳条件下孵育过夜。

第二天早上,使用洗板机将细胞培养基更换为 pH 7.0 的细胞外通量分析培养基,然后将细胞在 37 摄氏度、无二氧化碳条件下孵育 30 至 60 分钟。待细胞达到平衡后,将水化好的微孔板插入生物分析仪中,点击 开始 按钮以启动校准。

校准结束时,单击 解锁 盒式装置 提示移除芯片底板,加载细胞板,然后打开数据文件,从生物分析仪获取速率值并导出至电子表格文件。

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最后更新:22 八月 2026