记录急性海马切片中的神经元场兴奋性突触后电位

小鼠海马切片放入充满人工脑脊液或aCSF的浸没室中。

用固定网固定切片以防止移动。

持续循环含氧的 aCSF 以维持神经元活力。

安装参比电极以提供稳定的电压参考。

刺激和记录电极放置在与海马 CA1 锥体层对齐并平行的位置。

施加电脉冲。

这些脉冲刺激神经元，导致电压门控离子通道打开，允许正离子流入，并触发动作电位。

这些动作电位沿着神经元传播并诱导兴奋性神经递质释放到突触间隙中。

神经递质与突触后神经元上的特定受体结合，允许正离子流入并导致膜电位的变化——兴奋性突触后电位，或 EPSP。

记录电极测量记录区域（场 EPSP）内神经元群的 EPSP。

一小块镜头清洁纸和固定在U形铂丝上的尼龙网预浸泡在浸没切片室中几分钟。之后，取下U形铂线。关闭回收并在镜头清洁纸上放一片。然后，立即将切片固定网格放在切片顶部。

泵，让切片平衡 30 分钟，不要将物镜浸入 ACSF 中。同时，用 ACSF 填充记录电极，并将其安装到移液器支架中。

接下来，将被测的环氧绝缘钨刺激电极放入机械手支架中，将参考线放入切片室中。将第二个参比电极添加到腔室，并将其连接到记录电极头级的参比插座。

在放大器控制软件中，单击"零钳位模式"框，然后双击"输出增益列表"框。选择增益 100。双击高通滤波器盒（High-Pass Filter Box） 贝塞尔。选择 3 kHz 并双击低通滤波器列表框 AC 以选择 0.1 Hz。

在录制软件中，单击获取开放协议。选择一种协议，该协议具有允许偶发性刺激和 10 至 20 kHz 放大电位数字化 50 至 100 毫秒的设置，并在偶发性记录开始后 10 毫秒自动触发刺激隔离器。

刺激和记录电极与金字塔层对齐并平行放置。随后，单击获取编辑协议，然后在弹出窗口中选择触发器选项卡。单击"触发源"框，然后选择空格键作为触发源。然后，单击 OK 按钮并单击 记录 按钮开始采集。

在激励隔离器软件中，单击电压控制盒并输入零。单击下载按钮。之后，单击"录制软件"窗口并按空格键。通过按顺序输入 1,000 到 8,000 之间的值来重复此循环。将刺激强度与 FEPSP 斜率值相关联，并确定获得 FEPSP 斜率最大值 40% 所需的刺激强度。单击电压控制框并输入确定的值。然后，单击 下载 按钮。

在录制软件中，单击 停止 按钮，然后单击 获取 菜单。单击"编辑协议"，然后在弹出窗口中选择"触发器"选项卡。然后，单击"触发源"框并选择"内部计时器"作为触发源。单击"确定"按钮，然后单击"记录"按钮，每 60 秒开始自动记录一次场电位。单击 停止 30 到 60 分钟后按钮。

在录制软件中，单击获取开放协议并选择与基线录制相同的协议。单击"确定"按钮，然后单击"录制"。保持自动运行现场潜在记录两到四个小时。完成后，单击 停止 按钮终止录制。