0 次观看 • 2:53 分钟 • July 8th, 2025
将新生啮齿类动物的脑干-脊髓标本固定在记录室中,并持续灌注含氧人工脑脊液(aCSF)。去除覆盖在标本上的薄层组织。
脑干的神经元网络产生一种节律性电活动,称为吸气爆发,该活动被传递 通过 脊髓第四腹侧神经根(即C4神经根)的运动神经元控制呼吸。
将记录电极置于神经根附近,利用负压吸引使神经根进入电极内,形成封接。
脑干神经元的固有特性引起钠离子内流,导致膜去极化并产生动作电位,随后钾离子外流实现复极化。
随后的超极化会阻止新的动作电位产生,直到钠-钾ATP酶利用ATP恢复膜电位。
动作电位以节律性脉冲的形式传导至神经根。
灌注缺氧的人工脑脊液(aCSF)以阻断ATP生成并损害ATP酶功能,从而延迟动作电位并减少节律性簇状放电。
恢复含氧人工脑脊液后,节律性爆发的次数得以恢复。
在此操作步骤中,将神经组织置于记录室中,腹侧朝上。用固定针固定脊髓的最尾端部分以及脑干的最头端部分。随后,去除覆盖在神经组织表面的薄层蛛网膜组织。注意避免损伤神经组织的软脑膜及血管。接下来,用人工脑脊液(ACSF)填充电极。
使用显微操作器,小心地将电极放置在第四腹根附近。用注射器轻柔地吸住神经根丝。然后,将带有神经根丝的电极贴附于脊髓表面。随后,在常氧条件下至少记录20分钟由神经组织产生的电生理活动,以确定标本的基础参数。
将灌流液从通入碳酰气的ACSF更换为缺氧刺激ACSF,并记录15分钟。随后,将灌流液重新换回标准的通入碳酰气的ACSF,继续记录至少15分钟,然后结束记录。
本文展示了一种对新生啮齿类动物离体脑干-脊髓标本进行电生理记录的实验方案。该方法可通过记录第四腹侧神经根的吸气性爆发活动,在供氧和缺氧条件下监测神经呼吸网络的输出功能。
从离体脑干-脊髓标本中进行电生理记录,可在受控的代谢条件下精确探究神经呼吸网络的功能。该方法有助于在神经科学靶点早期验证中进行机制性风险评估并提高预测可信度,尤其适用于对代谢应激敏感的通路研究。该技术为评估神经回路的韧性与恢复能力提供了可重复的实验平台,可为神经药理学和呼吸系统治疗领域的研发管线决策提供依据。
该电生理学平台可整合到呼吸系统和神经药理学项目的发现流程中,从早期靶点验证直至临床前模型开发。
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
相关视频
0 观看次数
最后更新:29 八月 2026