利用强直性刺激在海马脑切片中诱导局部CA1区γ振荡

将脑切片固定在记录室中，并持续灌注含有高浓度镁的 aCSF，以阻断 N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）谷氨酸受体。

将刺激电极和记录电极放置在海马的Cornu ammonis 1（CA1）辐射层中。

进行刺激以获得电信号，确认神经元连接完整。

将刺激电极重新放置到 Oriens 层，记录电极放置到锥体细胞层，然后将它们插入更深的位置。

施加强直刺激，即高频电脉冲，以诱导来自Schaffer侧支轴突的兴奋性神经递质谷氨酸释放。

谷氨酸与CA1神经元上的谷氨酸受体结合，促进钠离子内流和膜去极化。

这会解除NMDA受体的阻断，允许钠离子和钙离子内流，从而增强神经元兴奋性。

兴奋的水平层中间神经元释放抑制性神经递质GABA，与CA1区神经元相互作用。

这种兴奋性与抑制性输入的平衡导致 CA1 神经元网络的同步化受控兴奋，产生称为伽马振荡的节律性脑电波，这对注意力和记忆至关重要。

将脑片放入记录室时，需将脑片置于浸没式记录室中，用持续灌流的人工脑脊液（ACSF）以每分钟1至2毫升的流速灌注，并将温度维持在32摄氏度。记录所用的ACSF与储存脑片的孵育室中的ACSF有所不同，其镁离子浓度从2毫摩尔升至4毫摩尔。

将半圆形不锈钢网置于脑片上固定，使其金属丝方向与海马 CA1 区平行。随后，在 32 摄氏度条件下，将灌流速度提高至每分钟 8 到 10 毫升。

使用解剖显微镜，将刺激电极移至辐射层（stratum oriens）的中部。然后，将记录电极尽可能靠近刺激电极的位置移至锥体细胞层。随后，将刺激电极和记录电极同时下移 50 至 100 微米进入脑片，以在给予 120 至 150 微安测试脉冲时诱发出 1 毫伏的场兴奋性突触后电位（field EPSP）。

为产生伽马振荡，使用一串20次、每次0.1毫秒、频率为200赫兹的脉冲刺激组织。每5分钟给予一次该强直性刺激，可获得可重复的反应。