小鼠视网膜色素上皮层的直接耦合视网膜电图记录 关键词:视网膜色素上皮,视网膜电图,ERG,RPE,小鼠,电生理学,直接耦合记录

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从一只暗适应且已麻醉的小鼠开始。

在角膜上施用麻醉剂和散瞳滴眼液。

将小鼠放置在带有微弱红光的圆顶前方的抬高平台上。 

将接地电极皮下固定于后肢,将参考电极置于口腔内。

取一个装有盐溶液毛细管的电极 holder,轻弹以去除气泡。

用盐溶液完全充满毛细管尖端。

将毛细管置于角膜上,以记录直接耦合的视网膜电图或直流视网膜电图(DC-ERG)。

直流-视网膜电图(DC-ERG)可测量视网膜色素上皮(RPE)的微小电反应。

RPE 是一种特化的单层细胞,可维持感光细胞的健康和结构完整性。

滴加一滴眼用润滑剂以维持导电性并防止干燥。

检查每只眼睛的电阻值,确保其相近且在正常范围内。

建立稳定的基线,然后开始记录直流视网膜电图(DC-ERG)。

在进行实验时,为固定小鼠并放置电极,首先在已镇静小鼠的角膜上滴加一滴0.5%盐酸丙帕卡因以麻醉角膜,随后滴加一滴2.5%盐酸去氧肾上腺素和0.5%托吡卡胺以散大角膜。

使用六步法的第一步,打开圆顶内的微弱红光,并将小鼠放置在加热的记录台上。用镊子小心地提起后腿皮肤,一手牢固握住针电极,另一手将电极皮下插入后腿,以固定电极位置。

将参比银/氯化银电极放入动物口腔内,使中心的电极 pellet 置于后侧颊部,并固定于牙齿后方。

在将毛细管电极放置到眼睛上之前,先将电极支架调整至玻璃毛细管垂直向下的位置,并用食指轻弹电极支架,以去除可能进入的气泡。

使用25号针头将HBSS填充至毛细管尖端,并检查毛细管,确保尖端内无气泡滞留。调整电极 holder 支架的位置,使装有HBSS的毛细管开口端轻轻接触角膜;小心操作以避免引入气泡,将润滑眼用凝胶 dispenser 倒置,弃去初始几滴。然后,将一滴润滑眼用凝胶分别置于每只眼睛上,以维持导电性并防止记录期间角膜干燥。