电生理记录 黑腹果蝇 挥发性气味物质刺激下的感器反应

0 次观看2:53 分钟 • July 8th, 2025

安装活体 果蝇 将果蝇置于管中,使其头部露出,触角粘附于胶带上,并用固定杆加以固定。

在加湿空气的持续气流下进行制备,以防止干燥。

将参考电极插入唇基(保护口器的支撑结构)以进入循环系统。

将记录电极放置在感受器附近,即昆虫的感觉器官处。

将电极插入感器的基部。

记录具有特异性尖峰的信号,以确认电极在嗅觉感受神经元附近的定位正确。

将含有测试气味物质的 cartridge 连接到递送管。

将管子对准果蝇的触角,调整其相对于电极的高度和距离。

使用软件设置气味流速和剂量,然后释放气味物质。

现在,记录电信号以捕捉果蝇对气味物质的神经元反应。

进行记录时,用快速而平稳的动作将参考电极插入唇基。将其置于表皮下方,使其与血淋巴接触。接着,缓慢降低记录电极,直至其进入目标感器的同一视野平面。然后,将记录电极插入感器基部。

在继续操作前,需确保信噪比较高,能够清晰识别来自at4A和at4C神经元的峰电位信号。at4A神经元的放电频率不应超过20赫兹。

现在,将 cartridge 连接到气味递送管。本实验中使用的是棕榈油酸 cartridge。接下来,利用显微操作仪将 cartridge 移动至样本附近,并对准头部。将 cartridge 尖端对准天线,距离约 4 毫米。同时,cartridge 应位于载玻片上方约 1 毫米处。

芯片应与电极和载玻片保持一定距离,理想情况下,与任一电极的距离至少为四毫米。进行刺激时,将气味流控制器设置为500毫秒的脉冲,流速设为每分钟500毫升。每次刺激脉冲期间,记录10秒钟的电活动。