小鼠脑楔形切片中听神经根刺激与突触后电流记录

将转基因小鼠脑组织楔形切片固定在灌流含氧人工脑脊液（aCSF）的记录室中。

较厚的楔形侧包含听神经根和耳蜗核，包括T型星形细胞和球状束状细胞。

较薄的一侧包含斜方体的内侧核和腹侧核，以及发出荧光的内侧橄榄耳蜗神经元。

在显微镜下定位听神经根，并将刺激电极放置在其上。

鉴定一个荧光标记的内侧橄榄耳蜗神经元，并将记录电极向其推进。

对神经元进行膜片钳操作，形成全细胞记录构型，并记录其电活动。

对听觉神经根施加电脉冲，激活耳蜗核细胞。

活化的T型星形细胞向内侧上橄榄耳蜗神经元释放兴奋性神经递质。

然而，球状小球细胞会激活抑制性通路，向内侧上橄榄耳蜗神经元释放抑制性神经递质。

兴奋性与抑制性信号的整合会产生突触后电流，从而证实脑片内存在神经元活动。

为进行电生理分析而准备楔形脑片时，将样本放入记录室中，用持续灌流的35 °C人工脑脊液（aCSF）孵育并稳定脑片。使用微分干涉差（DIC）光学系统，聚焦于脑片较厚一侧的听觉神经根，并使用显微操作器将双极钨刺激电极移至听觉神经根处，轻轻插入组织表面。

将视野移至薄侧的斜方体腹侧核，并在561纳米发射滤光片下通过落射荧光显微镜选择一个内侧耳蜗橄榄核神经元作为膜片钳电生理记录的目标。使用适合实验设计的内液填充记录电极，在微分干涉差（DIC）光学下对内侧耳蜗橄榄核神经元进行膜片钳并以全细胞构型记录。

调整听神经根的电刺激强度，以在内侧耳蜗橄榄核神经元中获得稳定的突触后反应。随后，运行适当的刺激程序，以观察内侧耳蜗橄榄核神经元中的诱突触电流。