0 次观看 • 3:50 分钟 • July 8th, 2025
将含有目标区域的脑片固定在记录室中。
将含有内液的记录电极置于突触后神经元上方，并形成全细胞记录构型。
将搜索用的膜片电极移近一个突触前神经元。
在寻找突触前细胞时，此移液管中装有基于钠的溶液，以防止神经元去极化。
使用轻柔的负压吸引，使搜索电极与细胞形成松封接构型。
保持膜电位，并施加大电流脉冲以触发突触前神经元的动作电位。
监测对此刺激的突触后反应。
如果未检测到反应，则换另一个突触前神经元进行膜片钳记录并重复刺激。
继续该过程，直至在突触后神经元中观察到反应。
用记录电极替换搜索电极，并在突触前神经元中建立全细胞记录构型。
施加电流脉冲以诱发突触前神经元的动作电位，并记录突触后反应。
制备好目标区域的脑片后，让其孵育。在此期间，拉制膜片电极，电极应具有细长的柄部。将脑片用铂金丝网固定在记录 chamber 中后，用细胞内液填充记录电极。
将移液管放入前置放大器中，以全细胞模式对一个假定的突触后神经元进行封接。使用一根电阻为8至10兆欧的搜索型移液管，其内充液中的钾盐已被钠盐取代，对搜索型移液管施加轻柔的负压，以松散细胞贴附构型封接一个潜在的突触前神经元。
在电流钳模式下，将膜电位在松散封接条件下维持在负30至负60毫伏之间。随后，施加0.2至2纳安的大电流脉冲，以诱发潜在突触前细胞的动作电位。
观察该动作电位在电压反应上表现为一个小的尖峰。将刺激频率设置为 0.1 赫兹，以防止突触后反应衰减。如果突触后神经元对被测试的潜在突触前神经元的刺激无反应，则以松封接模式另寻一个新的潜在突触前神经元进行记录。
以这种方式测试最多30个可能的突触前神经元，只要能形成电阻大于30兆欧的封接，就继续使用同一根搜索式膜片电极。
如果在松密封模式下的刺激在突触后神经元中诱发出潜伏期小于五毫秒的兴奋性突触后电位（EPSP）或抑制性突触后电位（IPSP），则将搜索电极从突触前神经元移开。
使用含有生物胞素的常规内液填充记录膜片电极，电极电阻为4至8兆欧，对突触前神经元进行膜片钳记录，并在全细胞电流钳模式下记录。通过向突触前神经元注入电流以诱发动作电位，同时记录突触后反应。