完整大鼠背根神经节的全细胞膜片钳记录

将固定的大鼠背根神经节（DRG）置于灌流 aCSF 的记录室中。

背根神经节（DRG）包含被卫星胶质细胞包绕的感觉神经元。

将充满细胞内液并连接至放大器的膜片钳电极施加正压，然后将其推进至目标神经元。

正压有助于穿过周围的卫星胶质细胞层并与神经元接触，在其膜上形成凹陷。

施加负压以与膜形成紧密密封。

接下来，施加负压脉冲以形成全细胞记录构型。校准放大器参数，以确保信号测量的准确性。

为了确定神经元的兴奋性，  向神经元施加短暂的递增电流，打开电压门控离子通道，从而引发动作电位。

测量引发动作电位所需的最小电流，即阈强度。

此外，施加一个梯度电流，以测量动作电位发生时的最低膜电位。 

在此步骤中，将电极溶液置于冰上以防止降解。接着，用过滤后的细胞内溶液填充玻璃膜片电极。然后，将移液管放入放大器头部的移液管固定架中。

在将移液管插入灌流液之前，通过5毫升注射器推动活塞约1毫升，对移液管施加轻微的正压。随后，在放大器上选择电压钳模式，并在软件中打开膜片测试界面。

在显微镜下，将移液管移至目标神经元附近。接着，从移液管施加正压，穿过卫星胶质细胞层，直至观察到神经元与周围卫星胶质细胞层之间的间隙突然增大。然后，继续将移液管向神经元推进，直至在神经元表面观察到凹陷。

在我们的制备过程中，神经元周围环绕着卫星胶质细胞。因此，为了穿透胶质细胞层并到达单个神经元，记录电极 pipette 保持较高的正压。

随后，降低正压。通过轻柔抽吸形成吉欧姆密封。

为获得全细胞记录构型，通过短暂但较强的负压吸引穿透神经元细胞膜。

或者，在施加吸力的同时使用放大器上的 zap 功能。

建立全细胞模式后，通过调节放大器上的电容和电阻补偿旋钮来补偿全细胞电容和串联电阻。然后关闭膜测试窗口。通过旋转放大器上的模式旋钮，选择电流钳正常模式。

随后，在软件中点击 打开 协议。选择并加载用于测量阈下电流（rheobase）的协议，然后点击 记录 以开始记录。为检测神经元兴奋性，通过逐步注入100皮安（pA）递增的去极化电流，测量输入电阻和阈下电流（rheobase）。