评估共培养体系中谷氨酸能神经元与胶质瘤细胞的相互作用

从一个置于图案化多电极阵列（MEA）上方的、经层粘连蛋白包被的分隔式微流控装置开始。

该设备承载着培养的由iPSC衍生的皮层谷氨酸能神经元，这些神经元附着在微电极阵列（MEA）的微电极上。

这些神经元相互传递信息 通过 电信号。将这些信号记录为神经元活动的基线。

接下来，将富含谷氨酸的儿童高级别胶质瘤细胞（一种脑肿瘤细胞）接种至装置中，并进行孵育。

随着时间推移，胶质瘤细胞进入通道并附着，建立共培养体系。随后，胶质瘤细胞释放谷氨酸，一种兴奋性神经递质。

释放的谷氨酸与神经元受体相互作用，导致钙离子和钠离子内流，从而引起神经元膜去极化。

这会诱导神经元兴奋性并增强神经元活性。

重新记录电信号，共培养后若出现显著增加，则表明神经元与胶质瘤细胞之间相互作用成功。

将消化后的UW479和BT35细胞接种到每个专用微流控装置中已成熟的贴壁谷氨酸能神经元上方。在37摄氏度、5%二氧化碳的受控环境中，使用谷氨酸能神经元D11及后续培养基，将共培养体系维持两天。

使用图像分析软件分析显微镜图片，对儿童高级别胶质瘤细胞进行计数以评估其活力，并计算细胞百分比。将MFD放入记录装置中，使用 commercially available software 在第21天对谷氨酸能神经元进行电生理记录。

在接种儿童高级别胶质瘤细胞之前，对作为对照、与共培养平行培养的已分化谷氨酸能神经元进行第二次电生理记录。