通过脑室内注射分析新生小鼠脑内小鼠巨细胞病毒分布

取一悬液，该悬液为经基因工程改造后表达增强型绿色荧光蛋白的小鼠巨细胞病毒，可用于可视化观察。

将悬浮液装入带有针头的注射器中。

接下来，将幼鼠置于冰上以进行麻醉。

确定幼鼠头部的注射位点。

将针头垂直插入颅骨表面，直至到达脑部充满脑脊液（即脑脊液，CSF）的侧脑室。

将悬液注射到侧脑室。

让幼崽恢复。

注射的病毒通过脑室脑脊液循环，到达边缘区的室管膜细胞以及脉络丛的上皮细胞。

该病毒附着于这些细胞的表面受体，内化后进行复制，并在细胞间传播，从而在脉络丛、边缘区及室下带建立急性感染。

首先用70%乙醇对10微升注射器和27号针头进行消毒。然后，通过缓慢拉动注射器活塞，将5微升小鼠巨细胞病毒注射液或荧光微珠加载至针头中。

将出生0.5天的新生小鼠置于冰上3至4分钟以进行麻醉和固定后，使用脚趾夹捏反应法来判断麻醉深度。用无毒实验室记号笔在麻醉后的小鼠头部标记注射位点，位置大约位于矢状缝外侧0.7至1.0毫米处，并从新生小鼠前囟向后（尾侧）0.7至1.0毫米处。该示意图对此位置进行了更详细的展示。

作为参考，使用无毒标记笔在针尖处标记2毫米的位置。接着，将针头垂直刺入颅骨表面标记的注射位点，深度为2毫米。然后，在不切开头皮的情况下，缓慢向侧脑室注射5 µL小鼠巨细胞病毒。

在另一组小鼠中，采用相同方法注射含有荧光微珠的5微升溶液。注射后，将针头留置原位10至20秒，以防止回流。随后缓慢拔出针头。将注射后的动物置于温暖的容器中恢复5至10分钟，直至其运动能力和整体反应性恢复正常。