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神经科学
0 次观看 • 3:16 分钟 • July 8th, 2025
将髓鞘来源的多肽与佐剂混合后,注射至麻醉小鼠外周淋巴结附近。
肽-佐剂偶联物可激活抗原呈递细胞(APC),后者可识别并加工这些肽段。
随后,抗原提呈细胞迁移至淋巴结并激活自身反应性T细胞。
定期腹腔注射百日咳毒素,该毒素可破坏内皮细胞间的紧密连接,从而增加血脑屏障的通透性。
自身反应性T细胞在血液中循环,并穿过血脑屏障进入脑组织。
这些细胞识别髓鞘上的肽段并释放细胞因子。
这些细胞因子将巨噬细胞和B细胞募集到该部位。
巨噬细胞释放活性氧,损伤产生髓鞘的少突胶质细胞,而B细胞与T细胞相互作用,被激活后产生靶向髓鞘的自身抗体。
这会导致脱髓鞘,损害神经传导。
抬起小鼠尾巴;若出现逐渐下垂,表明存在神经损伤,提示自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的发作。
按照文本方案所述,在特定无病原体条件下饲养的C57BL/6小鼠,首先对其进行麻醉。用一只手固定麻醉后的小鼠,将30微升MOG肽与完全荧光佐剂乳化液在靠近腹股沟淋巴结的后肢侧腹部皮下注射,每侧各注射一次。
现在,将小鼠腹部朝上放置,取20微升MOG肽乳剂,分别注射到尾根部左右两侧的柔软脂肪组织中。同时,将少量乳剂滴注到小鼠颈部皮下。向小鼠腹腔内注射100微升百日咳毒素溶液。操作时应握住小鼠头部并使其低于身体中心位置,以避免将溶液注入肠道。
在小鼠经历预期的临床疾病之前,将维持饮食更换为繁殖饮食,以提供更高能量的食物。在首次处理48小时后重复百日咳毒素注射。
每天早晨通过观察笼内情况检查EAE小鼠的健康状况。每天下午对EAE小鼠进行评分。将EAE实验中每只单独的小鼠从笼中取出,检查其尾巴是否有张力。
用手指将小鼠尾巴向上移动。健康的小鼠会保持尾巴上扬。如果临床EAE已经发生,尾巴张力会降低,表现为尾巴逐渐下垂。最终,小鼠将完全无法抬起尾巴。