利用荧光染料检测实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型中血脑屏障的破坏

首先使用含有与大分子葡聚糖链结合的绿色荧光染料的溶液，然后加入含有与小分子葡聚糖链结合的红色荧光染料的溶液。

充分混合染料，并吸入注射器中。

通过小鼠眼后静脉（眼球后方的静脉），将该染料混合物静脉注射到已麻醉的小鼠体内。

这只小鼠患有实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）。

在这种情况下，血脑屏障受到破坏，脑血管内皮细胞之间的紧密连接减弱，并出现间隙。

让小鼠完全苏醒并恢复活动能力，以使染料循环。

带有小分子葡聚糖链的红色染料可轻易穿过微小间隙进入脑组织，而与大分子葡聚糖链结合的绿色染料则只有在损伤严重时才会扩散。

脑组织中每种荧光染料的量与血脑屏障破坏程度相关。

配制葡聚糖储备溶液时，将10毫克3千道尔顿的德克萨斯红葡聚糖溶解于500微升0.9%氯化钠溶液中，将5毫克10千道尔顿的AlexaFluor 488葡聚糖溶解于250微升0.9%氯化钠溶液中。

配制葡聚糖工作液时，注射前立即用移液器将55微升10千道尔顿Dextran AlexaFluor 488储备液移取至一片封口膜上，然后加入55微升3千道尔顿Dextran Texas Red储备液。混匀后，用一次性细针头注射器收集100微升溶液。

接下来，将一只麻醉后的小鼠侧卧放置于实验台上。在小鼠苏醒前，经静脉注射100 µL荧光示踪剂。让示踪剂循环15分钟。