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以一只头部已剃毛、固定且麻醉的小鼠开始实验。
涂抹眼膏,并用碘伏对头皮进行消毒。
去除多余的碘,然后用手术巾覆盖小鼠。
沿中线做切口以暴露颅骨,并清洁伤口。
在颅骨一侧标记一个圆圈,以大脑皮层为靶点。
大脑皮层包含对脑与身体之间信号传递至关重要的运动神经元和感觉神经元。
以环形方式在标记处的颅骨上钻孔,然后移除骨瓣以暴露皮层。
将已灭菌的撞击探针置于暴露区域上方,敲击探针以对组织施加高压。
这种压力会引发大脑皮层的损伤,破坏运动和感觉神经元,并损害信号传导。
清理伤口并进行缝合。创伤性脑损伤小鼠模型已准备就绪,可用于后续实验。
进行单侧开颅手术时,需确认麻醉小鼠对脚趾夹捏无反应,并将小鼠固定于立体定位仪中。使用无菌棉签将抗生素眼膏涂抹于眼睛,并将碘伏溶液涂抹于已剃毛的头皮区域。随后用70%乙醇去除碘伏,并用带孔洞的手术巾覆盖动物体。
在头皮上做一道1.5至2厘米的正中切口,使用无菌棉签清洁伤口,并清除冠状缝左侧中线处的筋膜。使用撞击探针确定颅骨切除部位,并将立体定位仪的x=0、y=0参考点设于冠状缝。将探针调整至中线左侧2毫米处。使用精细尖端的外科安全标记笔,在预期撞击区域周围标记一个直径5毫米的圆形区域。
将撞击器抬起并旋转至偏离位置,完成直径5毫米的环形切口。短暂地将撞击器复位,以验证5毫米环形切口的准确性。随后再次将撞击器抬起并旋转至偏离位置,使用配备0.6或0.8毫米球形钻头的高速旋转微型电机套件手动工具,在颅骨上以最大速度的70%至80%钻出一个开口。钻孔时沿直径5毫米的环形轮廓施加轻柔压力,使该边缘变薄,然后用镊子提起所形成的骨瓣。
穿过缝线进行钻孔可能会有额外困难,因为骨组织在此处不连续,需要施加更大的压力。血管可能与该区域紧密相邻,因此容易发生出血事件。
为诱导轻度可控的皮层撞击损伤,使用无菌酒精棉片清洁撞击探针,并将撞击探针移回暴露的皮层上方位置。降低探针直至其接触硬脑膜表面,并将此位置标记为 z 等于 0。撤回活塞,然后移动至 z 等于负 1 毫米处,释放活塞以撞击皮层。立即抬起活塞并将机械臂移开,用大量生理盐水冲洗皮层,并使用间断缝合线和 5-0 丝线缝合头皮切口。