在大鼠模型中建立活性HIV感染

以麻醉的大鼠开始，对其剃毛的头部进行消毒，并将其固定于立体定位仪中。

沿中线做切口以暴露颅骨。

在颅骨上标记两个位置并钻出小孔。

将含有携带异嗜性HIV RNA的慢病毒载体的嵌合病毒的注射器连接到立体定位仪上。

将针插入孔中，靶向大脑皮层细胞，包括小胶质细胞（大脑的免疫细胞）。

缓慢注射病毒，以确保其在皮层中均匀分布。

注射后，缝合切口，对局部进行消毒，并让大鼠恢复。

注射的病毒与脑细胞受体相互作用，融合后将HIV RNA释放到细胞质中。

RNA被逆转录为DNA，并整合到细胞的DNA中。

受感染的细胞表达病毒组分，产生新的RNA和蛋白质。

这些病毒组装并释放为新的病毒颗粒，从而增加脑内的病毒载量，建立起活跃的HIV感染。

进行EcoHIV EGFP注射时，在确认足底反射消失后，剃除脑区毛发，并使用70%乙醇和含氯己定的消毒液对暴露的皮肤进行两次消毒。将大鼠俯卧位固定于立体定位仪上，沿头皮正中线做5至6厘米的皮肤切口。

在前囟外侧0.8毫米处标记一个钻孔位置，在前囟头侧1.2毫米处标记另一个钻孔位置，并在颅骨相应位置各钻一个直径为0.4毫米的孔。将滴度为每毫升1.04 × 10⁶转导单位的EcoHIV慢病毒溶液装入10微升注射器中，并将注射器固定至立体定位仪上。

将针头移至一个钻孔的表面附近，并将针头插入孔中2.5毫米。以每分钟0.2微升的速度注入1微升病毒溶液。当病毒溶液完全注射完毕后，将针头留在注射区域内部5分钟，然后缓慢回撤针头，直至完全退出大鼠颅骨。

使用4-0丝线缝合皮肤切口，并用70%乙醇消毒。然后将大鼠置于带有加热垫的恢复室中，持续监测直至其恢复卧姿。