通过淀粉样肽注射在斑马鱼脑内建立阿尔茨海默病模型

0 次观看2:47 分钟 • July 8th, 2025

用合成的单体淀粉样肽溶液填充玻璃注射毛细管,这些肽为具有聚集倾向特性的异常肽。

将毛细管插入显微注射持针器中。

将一条斑马鱼同时放入含有麻醉溶液的培养皿中。

鱼麻醉后,用镊子从侧面夹住鱼体以固定头部。

在鱼类头骨两侧骨板交界处做一个小切口,以进入富含神经元的前脑。

现在,将毛细管针穿过切口,将淀粉样肽溶液注入前脑。

将斑马鱼转移至装有循环水的恢复容器中。

在前脑内部,淀粉样肽在神经元附近积聚。

这些肽会自发错误折叠,形成β-折叠,并在神经元周围聚集,产生有毒的淀粉样斑块。

这些斑块会损伤神经元并损害其信号传导。

这建立了阿尔茨海默病的斑马鱼模型,阿尔茨海默病是一种以淀粉样斑块为特征的脑部疾病。

使用针头拉制仪,按照文本方案中所述参数制备玻璃注射毛细管。将压力源的压力设定为 25 PSI。然后,在显微注射仪上将维持压力设为 20 PSI,喷射压力设为 10 PSI,周期值设为 2.5,门控值设为 100 毫秒。接下来,用注射溶液加载玻璃毛细管。

然后,将玻璃毛细管插入显微注射持针器中,并将注射角度调整为45度。将一条鱼放入盛有麻醉溶液的新培养皿中。待其完全麻醉后,用镊子夹住鱼体并调整至适合注射的方位。使用30号针头的尖端,在视顶盖区域、两侧颅骨板交界处的颅骨上切开一个小口。仅使用针头尖端操作,穿透颅骨的深度不得超过1毫米。

然后,在继续握住鱼的同时,将玻璃毛细管的尖端通过切口处插入。将玻璃毛细管尖端朝向端脑,以45度角插入,随后注入1 µL溶液。将鱼放回运输容器中,直至其恢复。然后,将容器连接到持续循环的养鱼用水系统,以确保最佳水质。