建立新生小鼠缺氧缺血性脑损伤模型

0 次观看 • 3:09 分钟 • July 8th, 2025

在解剖显微镜下将麻醉后的幼鼠仰卧固定。

在颈部做一个切口。

牵拉脂肪组织以暴露单侧右侧颈动脉。

结扎动脉以限制血流至右脑半球,模拟缺血状态。

缝合切口并将幼崽转移至低氧室。

一旦幼鼠恢复意识,关闭舱室并降低氧气浓度,以建立缺氧环境。 

脑部血供减少和氧水平下降会导致兴奋性神经递质的释放。

这些神经递质可诱导神经元过度兴奋、钙离子内流以及钙依赖性的神经元膜、细胞蛋白和DNA损伤,最终导致神经元死亡。

作为反应,小胶质细胞被激活并释放促炎性细胞因子,从而加重脑损伤。

让幼鼠恢复并生长一周。

麻醉幼鼠,将其腹部朝下放置,并做头皮切口。

通过半透明的颅骨观察右半球的脑部病灶,以检测缺氧缺血性损伤。

对至少五只P7小鼠幼崽进行麻醉后,将一只幼崽仰卧置于解剖显微镜下,然后用酒精清洁颈部。开始手术时,使用剪刀在颈部做一处0.7毫米的切口。接着,用镊子小心地去除脂肪组织,直至暴露单侧右侧颈动脉。随后,使用5-0缝线结扎单侧右侧颈动脉。

现在,用5-0尼龙线缝合颈部切口,并对切口进行消毒。然后将幼鼠置于37摄氏度的低氧舱中,打开舱盖恢复约1小时。将另一只经过手术处理的小鼠也放入低氧舱中恢复。待所有幼鼠完全清醒后,关闭舱盖并降低气体浓度,以建立低氧环境。

缺氧90分钟后,将脑损伤的幼鼠放回笼中。一周后,按先前方法准备幼鼠进行手术,以观察损伤证据。在头皮上做切口,识别右半球后外侧区域的脑部病灶。透过半透明的颅骨观察皮质损伤和海马损伤的迹象,据此将幼鼠分为损伤组或未损伤对照组。检查完毕后,用缝线闭合头皮并对切口进行消毒。

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