通过淀粉样蛋白-β肽注射建立阿尔茨海默病大鼠模型

从一只固定并麻醉且颅骨已暴露的大鼠开始。

定位前囟，标记三个参考点，并小心钻孔。  清洁该区域。

通过其中一个孔，将生长因子注射到靠近海马体的丘脑前背侧核内。

在两个孔中固定两颗螺丝，将引导套管插入第三个孔，并用牙科水泥固定。用假性套管覆盖引导套管。

第二天，将内插管插入导向插管中，并将其连接至注射系统。

定期向脑侧脑室注射淀粉样蛋白β肽和三氯化铝，以促进其在海马体中的扩散。

随后，移除套管植入系统。对区域进行消毒，用骨水泥填充孔洞，并缝合切口。

随着时间推移，β-淀粉样肽会聚集形成有毒的斑块。

注射的生长因子和三氯化铝还会增强海马神经元周围斑块的形成，而海马神经元对记忆至关重要。

这会导致神经元死亡，引起类似于阿尔茨海默病的记忆障碍。

在麻醉的大鼠身上，首先使用手术剪剪除头顶部的毛发，并用碘伏进行消毒。

接下来，使用外科手术刀和剪刀沿颅骨中线纵向切开头皮。

分离皮下组织和筋膜。用0.3%过氧化氢擦拭颅骨顶骨，并用记号笔标记前囟。接着标记三个点：注射RHTGF-β1并固定第一颗螺钉的丘脑前背侧核位置，注射Aβ25-35和AICI3的侧脑室或LV区域，以及第二颗螺钉的固定位置。

使用可弯曲的骨钻，在颅骨上标记的三个点处轻轻钻出三个直径为1毫米的孔。用无菌干棉球反复止血并清洁颅骨表面。

接着，将连接至微注射泵的针头插入脑内深度4.2毫米处，并缓慢注入1微升RHTGF-β1至ad区域。注射后保留微注射针头2分钟，然后缓慢拔出。

使用小螺丝刀将两枚螺钉固定在之前标记的颅骨位置上。在螺钉固定完成后，首先将假插管经75%酒精浸泡消毒24小时后插入导向插管，组装插管植入系统。然后，在大鼠立体定位仪的插管夹持器辅助下，将不锈钢导管导向插管通过颅骨孔插入脑内，深度为4.6毫米，到达侧脑室（LV）区域。

接下来，以每1毫升义齿基托水加入1.5克的比例，将义齿基托材料与义齿基托水混合。将混合后的糊状物涂抹于导管套管的塑料基座及用于固定导管套管的两枚螺钉上，覆盖整个皮肤切口，以避免皮肤感染。

第二天，抽出假性套管，将内套管插入导向套管中。拧紧固定螺钉以固定内套管。

连接连接微量注射泵与内套管的聚乙烯管，调节注射速度为每分钟1微升。向侧脑室（LV）微量注射Aβ25-35。注射完成后等待5分钟，然后轻柔地拔出内套管。接着，再次将假性套管插入导向套管中。

术后第15天，使用手术剪和镊子拆除固化的义齿基托材料，移除套管植入系统，并用碘伏对伤口进行消毒。

最后，用骨水泥填充颅骨缺损处，并采用单纯间断缝合方法缝合皮肤。