小鼠模型中实验性自身免疫性脑脊髓炎的诱导

首先，将含有神经肽和灭活细菌佐剂的乳剂通过皮下注射注入麻醉小鼠体内。

在皮下组织中，佐剂会吸引抗原提呈细胞（APC），这些细胞通过主要组织相容性复合体加工并呈递神经元肽段。

活化的抗原提呈细胞到达淋巴结，并与初始T细胞相互作用，诱导其分化为自身反应性T细胞。

这些T细胞循环并到达血脑屏障（BBB）。

接下来，腹腔内注射细菌来源的外毒素。

外毒素到达血脑屏障（BBB），增加其通透性，从而允许T细胞浸润进入中枢神经系统（CNS）。

在中枢神经系统中，T细胞与呈递神经元肽的常驻抗原提呈细胞相互作用，促进细胞因子释放，从而诱导更多免疫细胞浸润。

免疫细胞释放促炎性细胞因子，导致髓鞘损伤。

此外，B细胞与T细胞相互作用并分泌自身抗体，进一步破坏髓鞘，从而建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）。

在此步骤中，将PTX以每毫升2微克的浓度溶于1×PBS中，并充分混匀。随后，在异氟烷短时麻醉下，于小鼠尾根部皮下注射100微升PLP/CFA，共注射两次。切勿在颈部背部注射，因为上背部或颈部皮肤的任何免疫反应都会干扰头部和脊髓的成像。

免疫后一至两小时，在小鼠腹腔内注射 100 微升 PTX。

然后，在免疫后24小时，再次向小鼠注射100 µL PTX。对于对照组小鼠，在尾根部两次注射不含PLP的100 µL CFA。