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神经科学
0 次观看 • 2:12 分钟 • July 8th, 2025
将转基因小鼠置于背侧位置。该小鼠表达一种突变形式的α-突触核蛋白,该蛋白易于聚集。
取α-突触核蛋白纤维的悬液,即错误折叠的α-突触核蛋白形成的聚集体。
将纤维注入腹腔,以使其在全身分布。
一旦进入血液,纤维束便会到达中枢神经系统,并与血脑屏障的内皮细胞结合。
纤维被运输 通过 囊泡穿过细胞并进入神经组织,随后通过内吞作用侵入神经元,促进突变型α-突触核蛋白的聚集。
这些聚集体通过胞吐作用释放,并扩散至邻近的神经元、小胶质细胞和星形胶质细胞。
聚集体的识别会触发小胶质细胞释放活性氧,从而损伤组织,同时释放细胞因子,招募更多的免疫细胞。这会导致神经炎症,进而引起神经细胞死亡。
让小鼠恢复,以评估α-突触核蛋白介导的神经炎症。
进行腹腔注射时,将动物置于含异氟烷的麻醉舱内进行短暂麻醉。再次轻捏动物的脚趾,确认其后肢无回缩反应,以确保麻醉效果充分。用50微升经超声处理的α-突触核蛋白纤维或PBS溶液填充一支27号一次性皮下注射针头。
将动物保持在背侧位置,头部朝向远离实验操作者的方向,并向下倾斜约45度。直接将物质注射到小鼠腹膜内,注意不要刺穿位于腹壁后方的小肠或盲肠。持续监测动物,直至其从麻醉状态中恢复。