评估实验性自身免疫性神经炎小鼠模型中的运动功能

将小鼠放置在跑步机上以记录其奔跑动作，评估其运动功能，即控制身体运动的能力。

测试后，将百日咳毒素注入麻醉小鼠的腹腔，以削弱其血-神经屏障。

接下来，去除小鼠肩胛骨之间的毛发，消毒该区域，并将含有佐剂的模拟髓鞘肽注射到皮下组织中。

为获得最佳反应效果，请重复进行两次注射。 

这些肽段可刺激抗原呈递细胞，后者迁移至淋巴结并产生自身反应性T细胞。

这些T细胞进入血液，穿过受损的神经-血液屏障，靶向周围神经，从而导致细胞因子的释放。

这会吸引巨噬细胞和B细胞，这些细胞释放效应分子，降解髓鞘。

髓鞘的破坏会损害神经信号传导，并引发实验性自身免疫性神经炎（EAN）。

最后，重复进行跑台实验。小鼠表现出跑步困难及肢体运动不协调，提示存在运动功能障碍。

在疾病诱导前3天，打开运动功能评估装置并开启灯光按钮。拿起小鼠，将其放入装有红色食用染料的容器中。将小鼠放入行走舱内，将跑步机速度设置为15厘米每秒。启动跑步机，然后点击“记录”，使用步态功能成像系统捕捉小鼠跑步运动36秒。

36 秒后，停止录制和跑步机，并将练习运行的视频文件保存到指定文件夹中。

首次免疫前一天，使用配备30_1/2号针头的0.5毫升注射器，向已麻醉的6至8周龄雄性C57 black 6小鼠腹腔注射250微升含1.6微克/毫升百日咳毒素的小鼠等渗PBS溶液。

第二天，将新配制的肽溶液（溶于0.9%生理盐水）与结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）溶液（20毫克/毫升，溶于完全弗氏佐剂）等体积混合，置于珠磨器中，在室温下以最大速度混合1分钟。

用接种物装填配备23号针头的注射器，在排出注射器筒内空气之前，先将注射器倒置并轻轻摇动。

接种前，在肩胛骨之间中线外侧去除毛发，并用70%乙醇对暴露的皮肤进行消毒。

然后，使用一把艾迪生镊夹住皮肤，通过皮下注射将50微升溶液注入百日咳毒素处理的小鼠体内。

次日早晨，按前述方法，在250 µL PBS中腹腔注射1.2 µg/mL的百日咳毒素，48小时后再次腹腔注射1.2 µg/mL的百日咳毒素。

三天后，在第三次百日咳注射后，于相同注射部位再次给予50微升新鲜配制的接种物，并在实验结束前每周两次监测动物的临床评分和运动功能。